[发明专利]一株富锌热带假丝酵母菌株及其应用

权利要求书

1.一株富锌热带假丝酵母菌株UDY-12，分类命名为热带假丝酵母（Candida tropicalis），保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路I号院3号，保藏日：2019年12月16日，保藏号：CGMCC No.19133。

2.权利要求1所述的富锌热带假丝酵母菌株UDY-12在制备富锌酵母饲料添加剂中的应用。

3.权利要求2所述的富锌热带假丝酵母菌株UDY-12在制备富锌酵母饲料添加剂中应用的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）制备种子液：将热带假丝酵母菌株UDY-12接入装有Zn²⁺平板培养基的三角瓶中，Zn²⁺的质量含量为500μg/mL，在28℃下培养36h，再接入装有Zn²⁺YEPD培养基的三角瓶中，置于摇床上，摇床转速180r/min，在28℃下培养60h，得发酵培养种子液；

所述的Zn²⁺为硫酸锌、氧化锌中的任一种；

所述的Zn²⁺平板培养基为，在麦芽汁培养基中添加硫酸锌储备液使锌元素含量达到500μg/mL，琼脂20.0g，用麦芽汁培养基定容至1L，115℃灭菌15 min制成；

所述的Zn²⁺YEPD培养基为，将40.0g葡萄糖、10.0g蛋白胨和10.0g酵母粉溶于去离子水中，添加硫酸锌储备液使锌元素含量达到500μg/mL，用去离子水定容至1L，121℃灭菌15min制成；

所述的麦芽汁培养基为，在6°波美度麦芽汁中加入琼脂20.0g，再用6°波美度麦芽汁定容至1 L，115℃灭菌15 min制成；

所述的硫酸锌储备液为，称取硫酸锌4.4237g，加蒸馏水100mL，121℃灭菌15 min，其中锌元素的浓度为10000μg/mL；

（2）制备发酵培养物：在质量糖浓度为30-80g/L的麦芽汁培养基中加入硫酸锌储备液，使锌元素含量达到300-800μg/mL，添加磷酸二氢钾2g，用麦芽汁培养基定容至1000mL，分装于三角瓶中，每瓶100mL，120℃灭菌15min，待灭菌培养基温度降到40℃以下时，接入灭菌培养基体积5-8%的发酵培养种子液，在转速为180r/min的摇床上30℃培养60h，得热带假丝酵母菌株UDY-12富锌酵母的发酵培养物，热带假丝酵母菌株生物质量为12.9-15.2g/L，菌株中锌的质量含量为≥7.98mg/g；

所述的质量糖浓度为30-80g/L的麦芽汁培养基是,1kg粉碎麦芽加水5L于不锈钢锅中50℃浸泡90min，升温至60℃糖化60min，再升温至70℃继续进行糖化，直到无淀粉反应，过滤后煮沸浓缩,再过滤稀释至适当糖度，115℃灭菌20min制成；

（3）制备富锌酵母饲料添加剂：将热带假丝酵母菌株UDY-12富锌酵母的发酵培养物采用板框压滤机过滤和浓缩，使可溶性固形物质量含量≥20%，在温度70℃、蒸汽出口温度为140℃的条件下进行流化床干燥，加入载体玉米淀粉或葡萄糖粉，制成不可溶或可溶两类富锌酵母饲料添加剂，使锌含量2-10mg/g，即为成品。