[发明专利]一种北豆根多糖及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种北豆根多糖，其特征在于，其单糖组成为α-D-葡萄糖，其主链由33个(1→6)-α-D-Glcp构成，在主链的其中一个(1→6)-α-D-Glcp的C-3位连有一个末端的α-D-Glcp，其结构式如下：

2.根据权利要求1所述的北豆根多糖，其特征在于，所述北豆根多糖中末端葡萄糖、(1→6)-α-D-葡萄糖和(1→3，6)-α-D-葡萄糖的组分摩尔比为2.74:31.27:1；所述的北豆根多糖，重均分子量为6.16×10³Da。

3.一种权利要求1所述的北豆根多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)水提：取北豆根药材，加蒸馏水，85℃-90℃提取3次，滤过，合并滤液，浓缩，加乙醇至乙醇体积含量为80％，静置24h，离心，得北豆根总多糖粗品；

(2)去蛋白：将步骤(1)所得的总多糖粗品溶于蒸馏水中，得北豆根总多糖粗品水溶液，然后向其中加入三氯乙酸-正丁醇溶液，振摇，静置，取下层溶液，真空除去溶剂，得到去蛋白后的多糖水提液，冻干得到北豆根粗多糖；三氯乙酸-正丁醇溶液的加入体积为北豆根总多糖粗品水溶液体积的1.8倍；

(3)柱层析：将步骤(2)得到的北豆根粗多糖溶解后经DEAE-纤维素柱层析，苯酚-硫酸法检测多糖，收集第三洗脱峰的洗脱液后将其再经凝胶柱层析，苯酚-硫酸法检测多糖，收集主峰中间部分的洗脱液，洗脱液经浓缩、透析和冻干后得到北豆根多糖。

4.根据权利要求3所述的北豆根多糖的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述离心速度为3000rpm-4000rpm，时间为15min-30min。

5.根据权利要求4所述的北豆根多糖的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，北豆根与蒸馏水的质量体积比为1g：20ml，提取温度为87℃，提取时间为每次2h，离心速度为3000rpm，离心时间为10min。

6.根据权利要求3所述的北豆根多糖的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述有机溶剂为正丁醇，所述的三氯乙酸质量分数为10％，所述三氯乙酸和正丁醇的体积比为1:10.5。

7.根据权利要求3所述的北豆根多糖的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述DEAE-纤维素柱层析的条件为：分步洗脱，洗脱液依次为蒸馏水、0.05mol/L NaCl溶液、0.1mol/LNaCl溶液、0.3mol/L NaCl溶液和0.5mol/L NaCl溶液，流速为4ml/min。

8.根据权利要求3所述的北豆根多糖的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的凝胶为Sephacryl S-100和Sephadex G-50，凝胶柱层析条件为：洗脱液为去离子水，流速为0.5ml/min。

9.一种权利要求1所述的北豆根多糖在制备免疫调节及抗肿瘤(辅助)药物中的应用。