[发明专利]一株禽腺病毒毒株及其在制备全病毒抗体ELISA检测试剂盒中的应用有效
申请号: | 202011233920.X | 申请日: | 2020-11-06 |
公开(公告)号: | CN112322588B | 公开(公告)日: | 2022-03-11 |
发明(设计)人: | 杨小蓉;马良;王增福;王天恺;常昊天;李晓冉;董春娜 | 申请(专利权)人: | 乾元浩生物股份有限公司 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;G01N33/569;G01N33/58;A61K39/235;A61P31/20;C12R1/93 |
代理公司: | 北京惟诚致远知识产权代理事务所(普通合伙) 11536 | 代理人: | 王慧凤;李巍 |
地址: | 100070 北京市丰台区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一株禽腺 病毒 及其 制备 抗体 elisa 检测 试剂盒 中的 应用 | ||
1.一株禽腺病毒(Fowl adenovirus)毒株,其特征在于:所述禽腺病毒毒株的名称为FAdV-GX1908,在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.19999。
2.含有权利要求1所述禽腺病毒FAdV-GX1908的生物制品,所述生物制品用于诊断禽腺病毒毒株病。
3.根据权利要求2所述的生物制品,其特征在于:所述的生物制品为诊断试剂。
4.权利要求1 和2所述禽腺病毒FAdV-GX1908在制备用于诊断禽腺病毒病的试剂中的应用。
5.一种禽腺病毒的全病毒抗体ELISA检测试剂盒,包括灭活的禽腺病毒FAdV-GX1908全病毒包被的酶标板和酶标二抗;所述禽腺病毒FAdV-GX1908在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No. 19999。
6.根据权利要求5所述的ELISA检测试剂盒,其特征在于:所述酶联反应板的获得方法是将灭活的禽腺病毒FAdV-GX1908全病毒用pH 值为 7.2 的磷酸盐缓冲溶液稀释到最佳工作浓度为18 ug/mL,然后加到 96 孔聚苯乙烯酶联反应板,2~8℃下放置 8~12 小时,使抗原与酶联反应板充分结合,然后按照 300μL/孔加入含5%脱脂奶pH7.2 的 PBS 缓冲液,37℃封闭处理 2小时,甩干,待酶联反应板干燥后 4℃密封保存。
7.根据权利要求5所述的ELISA检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括阳性对照血清和阴性对照血清;
所述阳性对照血清为是以禽腺病毒FAdV-GX1908禽腺病毒全病毒抗原人工感染后采集鸡血清;所述阴性对照血清为无特定病原体的鸡血清。
8.根据权利要求5所述的ELISA检测试剂盒,其特征在于:所述酶标二抗为辣根过氧化物酶标记的抗鸡二抗。
9.根据权利要求5所述的酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括底物液A、底物液B、终止液、样品稀释液和20倍浓缩洗涤液;所述底物液A为含 0.6mg/ml 过氧化氢尿素的柠檬酸磷酸盐缓冲液,所述底物液B为0.2mg/ml的四甲基联苯胺溶液,使用时两者以1:1的比例混合;所述终止液为2mol/L的硫酸溶液;样品稀释液为pH值为7.2的磷酸盐缓冲液;浓缩洗涤液为含有体积百分浓度为0.8%~1.2%的Tween-20的0.01mol/L,pH 值为7.4的磷酸盐缓冲液。
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