[发明专利]一种降解阿维菌素的苍白杆菌AVM-2及其在水产养殖中的应用

说明书

本申请公开一种降解阿维菌素的苍白杆菌AVM‑2及其在水产养殖中的应用，从受农药污染的中华绒螯蟹养殖池塘的底泥土壤中分离纯化出一株以阿维菌素为唯一碳源的生长的菌株，该菌株利用阿维菌素作为碳源进行生长，菌株有降解能力，命名为AVM‑2，通过形态学、生理生化特性、16SrDNA鉴定确定其属于苍白杆菌；中华绒螯蟹的养殖水体中，加入阿维菌素使其初始浓度达到5 mg/L，再加入分离出的降解菌AVM‑2，使水体中菌液浓度为4.0×10⁶ CFU/mL。在加入降解菌株的实验组中，中华绒螯蟹肝胰腺和肌肉组织中阿维菌素残留量都显著降低，苍白杆菌AVM‑2对肝胰腺和肌肉中阿维菌素的降解率达60%以上。

技术领域

本申请涉及水产养殖中阿维菌素降解技术领域，特别是涉及一种降解阿维菌素的苍白杆菌AVM-2及其在水产养殖中的应用。

背景技术

中华绒螯蟹 (Eriocheir sinemis) 又称河蟹，由于其味道鲜美，营养价值丰富，烹制简单等深受人们喜爱。目前我国河蟹的养殖量与市场需求都在极速上升，其质量安全等问题也备受关注。在河蟹养殖中，阿维菌素被用来去除野生鱼类和寄生虫，然而水生动物对其较为敏感，残留的阿维菌素对河蟹的生长和品质有很大的影响。

本专利针对阿维菌素对水产甲壳动物的残留药害问题，以阿维菌素为研究对象，从土壤中富集筛选出阿维菌素的高效降解菌株，利用细菌个体形态特征、生理生化特征并结合16S rDNA 基因序列分析进行菌株的鉴定，并研究其降解菌的最佳培养条件、纯培养条件下的降解特性，然后采用实验室养殖实验方法，研究降解菌对河蟹养殖中阿维菌素残留的影响，旨在降低或清除水产经济动物中阿维菌素残留问题。本实验通过对阿维菌素降解菌的筛选，以期减少环境中的药物的残留问题，并为环境的生物修复的提供科学依据。

申请内容

解决的技术问题：

本申请需要解决的技术问题是现有技术中残留的阿维菌素对河蟹的生长和品质有很大的影响等技术问题，提供一种降解阿维菌素的苍白杆菌AVM-2及其在水产养殖中的应用，降低或清除水产经济动物中阿维菌素残留问题。

技术方案：

一种降解阿维菌素的苍白杆菌AVM-2，从受农药污染的中华绒螯蟹养殖池塘的底泥土壤中分离纯化出一株以阿维菌素为唯一碳源的生长的菌株，该菌株利用阿维菌素作为碳源进行生长，菌株有降解能力，命名为AVM-2，通过形态学、生理生化特性、16SrDNA鉴定确定其属于苍白杆菌。

本申请还公开了一种降解阿维菌素的苍白杆菌AVM-2在水产养殖中的应用，步骤为：

第一步，接种量、pH值、温度、农药初始浓度对菌株降解能力的影响：苍白杆菌AVM-2菌株在低菌量时，对阿维菌素的降解效率随接种量增大而升高，当细菌接种浓度为4×10⁶ CFU/mL时，阿维菌素的降解效率最高，达到32.1%，随后随着细菌接种浓度的增加，阿维菌素的降解率下降并趋于稳定，随着农药初始浓度增加，苍白杆菌AVM-2的降解率逐渐降低；

第二步：当阿维菌素浓度为60 mg/L时，苍白杆菌AVM-23 d降解率最高，达到33.59%，随底物浓度增加，降解效果被抑制，当阿维菌素浓度为240 mg/L时，3 d降解率为25.71%；

第三步，测定pH值对苍白杆菌AVM-2的降解率影响：在强酸或强碱条件下，降解效果较差，当pH 为5、6、10时，3 d降解效率分别为8.64%、11.23%和10.06%，当pH 为7时，3 d降解率最高为33.15%，随着环境偏碱性后，菌株的降解效率也开始呈现降低趋势，当pH为8时，降解效率显著降低，为31.32%；