[发明专利]一种酵母重组菌及其在减少蛋鸡盲肠氨气产生中的应用

说明书

本发明公开了一种酵母重组菌及其在减少蛋鸡盲肠氨气产生中的应用。本发明的酵母重组菌是将含有gdhA基因和glnA基因的重组表达载体转化毕赤酵母GS115菌株后得到。本发明通过基因工程手段，将凝结芽胞杆菌中glnA基因以及屎肠球菌中gdhA基因导入毕赤酵母中，构建双基因重组菌，该双基因重组菌能高效表达谷氨酸脱氢酶和谷氨酰胺合成酶，并能降低蛋鸡盲肠中75％的氨气排放，成本低廉，易于培养，并具有无残留、无副作用、不产生抗性等优点，有着广泛应用的前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种酵母重组菌及其在减少蛋鸡盲肠氨气产生中的应用。

背景技术

畜禽舍产生的臭气约70％来源于畜禽体盲肠发酵和排泄物发酵。因此，对畜禽肠道微生物进行调控是目前畜禽体臭气减排的主要手段。益生菌具有成本低、操作简单、无毒无害无污染、安全性高、不产生抗性等优势，被广泛应用于畜禽生产。虽氨氮降解菌筛选与培育已有大量基础研究，但应用于动物体氨气减排的益生菌的研究较少且氨气减排效果较低。

发明内容

本发明的目的在于提供一种酵母重组菌及其在减少蛋鸡盲肠氨气产生中的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种酵母重组菌，含有谷氨酸脱氢酶基因gdhA和谷氨酰胺合成酶基因glnA；

所述的酵母重组菌，是将含有gdhA基因和glnA基因的重组表达载体转化毕赤酵母GS115菌株后得到；

所述的重组表达载体，其基底载体优选pPICZA质粒；

所述的重组表达载体经线性化处理后转化毕赤酵母GS115菌株。

上述的酵母重组菌可以应用于减少蛋鸡盲肠氨气的产生；

在存在甲醇诱导表达的情况下，上述酵母重组菌的表达逐日增强，在第5天达到峰值，谷氨酸脱氢酶的酶比活力从5.31U/mg提高至15.23U/mg；谷氨酰胺合成酶的酶比活力从4.32U/mg增长至13.14U/mg；在存在甲醇诱导表达的情况下，上述酵母重组菌对培养基中的氨氮去除率高达74.8％。

优选地，在向蛋鸡喂食饲料的同时，喂食经过诱导表达的上述酵母重组菌菌液，可以有效降低蛋鸡盲肠的氨气产量；

进一步优选地，所述诱导表达的条件是：菌液接种量2％、摇瓶装液量为10％、2％的甲醇添加量、诱导表达5天；

特别优选地，在体外模拟蛋鸡盲肠发酵底物的产气试验中，每500mg发酵底物搭配3mL经过诱导表达的上述酵母重组菌菌液，可以大幅降低氨气产气量；

所述的发酵底物为常用的蛋鸡饲料。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

本发明通过基因工程手段，将凝结芽胞杆菌中glnA基因以及屎肠球菌中gdhA基因导入毕赤酵母中，构建双基因重组菌，该双基因重组菌能高效表达谷氨酸脱氢酶和谷氨酰胺合成酶，并能降低蛋鸡盲肠中75％的氨气排放，成本低廉，易于培养，并具有无残留、无副作用、不产生抗性等优点，有着广泛应用的前景。

附图说明

图1为本发明的酵母重组菌在体外对模拟蛋鸡盲肠发酵底物氨气产量的影响。

图2为本发明的酵母重组菌在体外对模拟蛋鸡盲肠环境中理化指标的影响。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1：双基因重组菌的构建