[发明专利]酒当归水煎液的制备方法及其活性成分在制备提高免疫力的药物中的应用

说明书

本发明提供酒当归水煎液的制备方法，将酒当归用水浸泡后提取1次；料液比7.69:1mL/g，浸泡时间119.78min，提取时间143.35min。本发明还提供酒当归水煎液活性成分在制备提高免疫力的药物中的应用。本发明通过单因素实验结合响应面分析法筛选酒当归水提液的最佳制备工艺条件，响应面图和等高线图可以检验和预测变量的响应值以及分析和确定变量之间的相互关系。当固定一个因素时，研究另外两个因素及其交互作用对OD值的影响，可以验证模型的可行性和合理性，直观的反映出响应值和变量之间存在的关系。本发明发现酒当归水煎液的水提和正丁醇部位具有提高免疫力功效，与其中所含的多糖、阿魏酸、咖啡酸含量相关。

技术领域

本发明涉及酒当归水煎液的制备方法及其活性成分在制备提高免疫力的药物中的应用。

背景技术

当归为多年生草本植物，是甘肃省道地药材之一，具有补血、活血、调经止痛、润肠滑肠等功效；酒当归其性温，具有活血散瘀的功效，在临床主要用于血瘀、产后血瘀腹痛、跌打损伤及风湿痹痛等症。多糖作为当归的主要水溶性成分，具有增强机体免疫力、抗辐射、补血、抗氧化、抗病毒、镇痛、止血、抗肿瘤等作用，阿魏酸作为当归有机酸中的主要活性成分，具有清除自由基、抗氧化、改善动脉粥样硬化、抗心肌缺血、调节免疫等作用。

当归炮制的众多方法中选取酒当归炮制法的原因是研究表明酒制当归中多糖的含量高于生当归，酒制当归更有利于阿魏酸的溶出。

“归一值”(overall desirability,OD)是一个能反映总体效应结果的值，通过Hassan法进行归一化处理达到指标的综合效果。该方法可以将不同量纲和不同数量级大小的数据转变成具有相同量纲和相同数量级的具有可比性的数据。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了酒当归水煎液的制备方法及其活性成分在制备提高免疫力的药物中的应用。本发明通过当归样品采集及酒当归炮制、酒当归水煎液制备工艺研究，获得了酒当归水煎液的最佳提取方法，使用该方法获得的粗多糖和阿魏酸的含量最高。另外，本发明还通过动物试验，筛选出酒当归水煎液中的提高免疫力活性部位，并采用HPLC技术对其成分进行定性定量分析。

本发明提供酒当归水煎液的制备方法，将酒当归用水浸泡，然后进行水煎煮提取1次；其中，酒当归与水的料液比为7.69:1mL/g，浸泡时间为119.78min，提取时间为143.35min。

本发明提供酒当归水煎液制备方法的优化方法，步骤如下：

(1)采用苯酚-硫酸法和高效液相色谱法分别测定酒当归水煎液中粗多糖和阿魏酸的含量；

(2)将酒当归水煎液中粗多糖和阿魏酸含量进行归一值处理；

(3)单因素实验选取酒当归水煎液制备方法中料液比、浸泡时间和煎煮时间的最佳条件；

(4)根据单因素实验的结果，确定响应面试验设计的因素和水平，采用Design-Expert8.0.6Trial软件，选择Box-Behnken中心试验，设计优化酒当归水煎液的最佳提取条件。

作为优选，步骤(4)中，所述设计优化酒当归水煎液的最佳提取条件的具体方法为：在料液比、提取时间、浸泡时间三个单因素实验的基础上，由Design-Expert 8.0.6统计分析软件中的Box-Benhken试验设计，以OD值为响应面，料液比A、提取时间B、浸泡时间C为自变量，建立三因素三水平的中心组合设计，进行非线性回归的二次多项式模型拟合，得到响应值OD对三个因素的二次多项回归方程：