[发明专利]用于植物源成分检测的LMCP引物组、试剂盒及其应用在审
申请号: | 202011238703.X | 申请日: | 2020-11-09 |
公开(公告)号: | CN112662797A | 公开(公告)日: | 2021-04-16 |
发明(设计)人: | 王德国;张萌;张永清;孙军涛;王永真;宋春美;肖付刚 | 申请(专利权)人: | 许昌学院 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 郑州铭晟知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 41134 | 代理人: | 张鹏 |
地址: | 461000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 植物 成分 检测 lmcp 引物 试剂盒 及其 应用 | ||
1.用于植物源成分检测的LMCP引物组,其特征在于,所述引物组具有如下所示的核苷酸序列:
P:5`-CGGGCGCAACTTGCTTTTTTGCAGAATCCCGTGAACCA-3`
D:5`-CCCGAAGCCATTAGGTTTTGACGCCCAGGCAGACGTG-3`。
2.用于植物源成分检测的试剂,其特征在于,所述试剂包括如权利要求1所述的引物组。
3.用于植物源成分检测的反应体系,其特征在于,所述反应体系包括如权利要求1所述的引物组或如权利要求2所述的试剂。
4.根据权利要求3所述的用于植物源成分检测的反应体系,其特征在于,还包括DNA聚合酶(大片段),所述DNA聚合酶(大片段)为耐热DNA聚合酶(大片段),所述耐热DNA聚合酶(大片段)包括但不限于Bst DNA Polymerase(large fragement)或Bsu DNA Polymerase(large fragement)或Bsm DNA Polymerase(large fragement)或DNA polymerase(large fragement)或Pfu DNA Plolymerase(large fragement)中的任意一种。
5.根据权利要求4所述的用于植物源成分检测的反应体系,其特征在于,还包括模板、甜菜碱、DMSO、dNTP、MgSO4、EvaGreen和DNA聚合酶缓冲液中的任意一种或几种的组合。
6.根据权利要求5所述的用于植物源成分检测的反应体系,其特征在于,反应体系为10μl,包括Bst DNA Polymerase Buffer(10X)1.0μl、DNA模板1.0μl、引物P 0.8μM、引物D 0.8μM、甜菜碱1.0mol、DMSO 5%、dNTP 1.2mmol、MgSO4 4-6.0mmol、EvaGreen 1×和Bst DNAPolymerase(large fragement)3.2U,Nuclease-free water补充至10μl。
7.用于植物源成分检测的试剂盒,其特征在于,包括如权利要求1所述的引物组或如权利要求2所述的试剂或如权利要求3-6中任意一项所述的反应体系。
8.植物源成分检测的方法,其特征在于,采用如权利要求1所述的引物组或如权利要求2所述的试剂或如权利要求3-6中任意一项所述的反应体系或如权利要求8所述的试剂盒进行核酸扩增以检测样品中是否含有植物源成分。
9.根据权利要求8所述的植物源成分检测的方法,其特征在于,所述核酸扩增在55-61℃等温条件下进行;所述等温扩增的时间为30-60min;所述扩增在实时荧光定量PCR系统中进行,若扩增结果图中出现指数曲线,则样品中含有植物rRNA基因片段,样品中含有植物源成分;若扩增结果图中未出现指数曲线,则样品中不含有植物rRNA基因片段,样品中不含有植物源成分。
10.如权利要求1所述的引物组、如权利要求2所述的试剂、如权利要求3-6中任意一项所述的反应体系或如权利要求7所述的试剂盒中的任意一种在检测样品中是否含有植物源成分或作为植物特异性基因LMCP检测内标引物中的应用;所述样品包括但不限于肉制品、乳制品、蛋制品、动物油制品、动物血制品、动物皮毛制品或假发制品。
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