[发明专利]一种基于镧系元素化学发光法长效生长激素免疫定量检测试剂盒及其方法在审
申请号: | 202011238934.0 | 申请日: | 2020-11-09 |
公开(公告)号: | CN112362643A | 公开(公告)日: | 2021-02-12 |
发明(设计)人: | 王富伟;王珊;王英武;王秋实;耿昕颖 | 申请(专利权)人: | 长春金赛药业有限责任公司 |
主分类号: | G01N21/76 | 分类号: | G01N21/76;G01N21/64;G01N33/68 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 潘颖 |
地址: | 130012 吉林*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 元素 化学 发光 长效 生长激素 免疫 定量 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种基于镧系元素化学发光法长效生长激素免疫定量检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:
PEG抗体、微孔板,生物素标记的PEG-rhGH抗体工作液,链霉亲和素标记的镧系元素铕工作液,增强解离液,PEG-rhGH抗原标准品和质控品。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述PEG-rhGH标准品为在0.1~150ng/mL范围内的一系列梯度浓度的标准品;
所述质控品为在2~100ng/mL范围内的高、中、低浓度的质控品。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括包被缓冲液、洗涤缓冲液、封闭液、样品稀释液中的一种或几种。
4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述包被缓冲液为0.05~0.10M、pH7.0~8.0的磷酸盐缓冲液;
所述洗涤缓冲液为含有0.4~0.6mM Tween-20的0.05~0.10M磷酸盐缓冲液;
所述封闭液为含有4%~6%脱脂奶粉的0.05~0.10M磷酸盐缓冲液。
5.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述样品稀释液为0.05~0.10M、pH7.0~8.0的磷酸盐缓冲液。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的试剂盒,其特征在于,生物素标记的PEG-rhGH抗体用检测抗体稀释液稀释后得到生物素标记的PEG-rhGH抗体工作液;所述检测抗体稀释液为含有0.8%~1.2%的牛血清白蛋白的0.05~0.10M磷酸盐缓冲液;
链霉亲和素标记的镧系元素铕用链霉亲和素标记的镧系元素铕稀释液稀释后得到链霉亲和素标记的镧系元素铕工作液;所述链霉亲和素标记的镧系元素铕稀释液为DELFIAassay buffer。
7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述生物素标记的PEG-rhGH抗体的稀释倍数为1:(1400~1800);
所述链霉亲和素标记的镧系元素铕的稀释倍数为1:(800~1200)。
8.一种非诊断目的的长效生长激素免疫定量检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1:将PEG抗体加入微孔板,包被,洗板,封闭,得到PEG抗体包被的微孔板;
步骤2:将样品采用样品稀释液稀释,然后加入PEG抗体包被的微孔板中孵育;
步骤3:将生物素标记的PEG-rhGH抗体工作液加入微孔板中孵育;
步骤4:将链霉亲和素标记的镧系元素铕工作液加入微孔板中孵育;
步骤5:最后加入增强解离液,震荡;
步骤6:激发光330,发射光620,读取荧光值;采用外标法得到样品中长效生长激素的含量。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述PEG抗体的包被浓度为6~10μg/mL,包被温度为2~8℃,包被时间为10~20h;封闭的温度为35~40℃,封闭的时间为1.5~2.5小时。
10.根据权利要求8或9所述的方法,其特征在于,所述孵育的温度为20~30℃,孵育的时间为0.5~1.5h;
震荡的转速为100~200rpm,震荡的时间为10~30分钟。
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