[发明专利]提高重组大肠杆菌中2’-岩藻糖基乳糖产量的方法在审
| 申请号： | 202011240682.5 | 申请日： | 2020-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN112322565A | 公开（公告）日： | 2021-02-05 |
| 发明（设计）人： | 刘龙;陈坚;刘振民;堵国成;李江华;吕雪芹;苏米亚;林璐;房峻 | 申请（专利权）人： | 江南大学;光明乳业股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/62;C12P19/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人： | 王玉仙 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 提高 重组 大肠杆菌 岩藻糖基 乳糖 产量 方法 | ||
1.一种提高重组大肠杆菌中2'-岩藻糖基乳糖产量的方法，其特征在于，所述方法是在大肠杆菌宿主中异源表达N端融合蛋白标签的α-1,2-岩藻糖基转移酶。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的大肠杆菌宿主为大肠杆菌MG1655△fliR::futC,△fuck::fkp,△lacI,△wcaJ,△lacZ,△flgA::futC,△flgG::futC。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的蛋白标签为麦芽糖结合蛋白、硫氧还蛋白A、转录终止抗终止因子或类泛素蛋白修饰分子。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的硫氧还蛋白A的氨基酸序列如SEQID NO.2所示，类泛素蛋白修饰分子的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，麦芽糖结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，转录终止抗终止因子的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的蛋白标签与α-1,2-岩藻糖基转移酶之间通过Linker进行连接，所述的Linker为(GGGGS)2。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的α-1,2-岩藻糖基转移酶来源于幽门螺旋杆菌，α-1,2-岩藻糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的N端融合蛋白标签的α-1,2-岩藻糖基转移酶通过组成型启动子Ptac进行表达。
8.一种大肠杆菌重组菌，其特征在于，所述的大肠杆菌重组菌是在大肠杆菌宿主中异源表达N端融合蛋白标签的α-1,2-岩藻糖基转移酶；所述的大肠杆菌宿主菌为大肠杆菌MG1655△fliR::futC,△fuck::fkp,△lacI,△wcaJ,△lacZ,△flgA::futC,△flgG::futC，所述的蛋白标签为硫氧还蛋白A，且所述的N端融合蛋白标签的α-1,2-岩藻糖基转移酶通过组成型启动子Ptac进行表达。
9.权利要求8所述的大肠杆菌重组菌在合成2'-岩藻糖基乳糖中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的应用是将所述大肠杆菌重组菌种子液以0.5-2％的接种量接种至发酵培养基中，于30-37℃、200-2 50r/min条件下培养5-10h后，添加L-岩藻糖1-5g/L、乳糖1-5g/L，继续发酵至60-80h，分离发酵液得到2'-岩藻糖基乳糖。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江南大学;光明乳业股份有限公司，未经江南大学;光明乳业股份有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202011240682.5/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种保鲜米粉及其加工方法
- 下一篇：一种应用于嵌入式软件的通用系统
