[发明专利]一种表征COVID-19康复患者血浆中和抗体活性的间接ELISA检测方法在审
| 申请号： | 202011241648.X | 申请日： | 2020-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN112526139A | 公开（公告）日： | 2021-03-19 |
| 发明（设计）人： | 孔庆明;吕杭军;袁亚杰;陆绍红;高孟;卓洵辉;金子;丁豪杰;丁建祖;楼涤 | 申请（专利权）人： | 杭州医学院 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/569;G01N33/543 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈金龙 |
| 地址： | 310053*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 表征 covid 19 康复 患者 血浆 中和 抗体 活性 间接 elisa 检测 方法 | ||
1.一种表征COVID-19康复患者血浆中和抗体活性的间接ELISA方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)使用SARS-CoV-2病毒的RBD抗原与N抗原组合包被酶标板，包被后用封闭液进行封闭；
(2)将待检测COVID-19康复患者的血浆稀释后加入步骤(1)处理好的酶标板中孵育；
(3)洗板后，加入二抗孵育；
(4)孵育后洗板，然后加入显色液显色后检测吸光度值，吸光度值越高表明该待检测COVID-19康复患者的血浆中和抗体活性越高。
2.如权利要求1所述的间接ELISA检测方法，其特征在于，步骤(1)中RBD抗原与N抗原的组合比例为1∶1/7～7。
3.如权利要求2所述的间接ELISA检测方法，其特征在于，步骤(1)中RBD抗原与N抗原的组合比例为1∶3～5。
4.如权利要求1所述的间接ELISA检测方法，其特征在于，步骤(2)中将待检测COVID-19康复患者的血浆先灭活处理后，再稀释。
5.如权利要求4所述的间接ELISA检测方法，其特征在于，灭活时将待检测COVID-19康复患者的血浆于56℃水浴锅中进行30min灭活处理。
6.如权利要求4所述的间接ELISA检测方法，其特征在于，稀释时，先用封闭液进行1∶100初始稀释，再以2倍梯度稀释，共8个梯度。
7.一种表征COVID-19康复患者血浆中和抗体活性的间接ELISA检测用的试剂盒，其特征在于，包括SARS-CoV-2病毒的RBD抗原与N抗原。
8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，RBD抗原与N抗原的组合比例为1∶1/7～7。
9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，RBD抗原与N抗原的组合比例为1∶3～5。
10.如权利要求7～9所述试剂盒在筛选血浆中和抗体活性的新冠血浆中的应用。
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