[发明专利]基于核衣壳蛋白的融合蛋白的新型冠状病毒检测的试剂盒

说明书

本发明提出一种基于核衣壳蛋白的融合蛋白的新型冠状病毒检测的试剂盒，所述试剂盒包括用于新型冠状病毒检测的抗原，所述用于新型冠状病毒检测的抗原包括基于核衣壳蛋白的融合蛋白。上述基于核衣壳蛋白的融合蛋白的新型冠状病毒检测的试剂盒，通过融合技术获得含有新型冠状病毒的核衣壳蛋白的融合蛋白，使融合蛋白具有新型冠状病毒核衣壳蛋白的天然空间结构特征，用于新型冠状病毒检测时灵敏度高、特异性强，利用该基于核衣壳蛋白的融合蛋白进行新型冠状病毒检测能够有效提高新型冠状病毒的检出率，确保新型冠状病毒肺炎的及时确诊，能够有效避免疫情的扩散。

技术领域

本发明涉及生物医药检测领域，特别是涉及一种基于核衣壳蛋白的融合蛋白的新型冠状病毒检测的试剂盒。

背景技术

新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019，COVID-19)是由感染新型冠状病毒(SARS-CoV-2，亦称2019-nCoV)引起的以肺部病变为主的新发传染病，可引起消化系统和神经系统的损伤，严重者可导致死亡。目前针对2019-nCoV的还没有特效治疗药物，疫苗也处于临床试验阶段，患者的早诊断、及时收治和隔离对有效控制疫情至关重要。新冠病毒感染的大量排查主要还是采用核酸检测，核酸检测因其敏感性强成为疑似病例确诊的金标准，但该技术对实验场所及人员要求高、操作繁琐、受环境条件影响比较大，容易受气溶胶的污染出现假阳性。传统的抗原抗体反应是临床实验室检测的重要补充，利用抗原去检测感染者血清中的抗体是快速筛查和核酸辅助诊断的重要手段。目前很多公司已经开发出通过血清学诊断方法用于COVID-19临床诊断的检测试剂盒，如胶体金法和传统ELISA方法，筛选出SARS-CoV-2中保守的具有优势表位的抗原或联合抗原是血清学诊断成功的关键。SARS-CoV-2基因大小约为29.8kb，基因组被注释为含有14个开放阅读框(Opening readingframe，ORF)，共编码27～28个蛋白质。核衣壳蛋白(N蛋白)是SARS-CoV-2的一种主要的结构蛋白，序列表如SEQ ID No.4所示，其位于病毒内部，是干扰素(Interferon，IFN)的拮抗剂和病毒编码的RNA干扰抑制因子，与病毒的复制有关，N蛋白在β属冠状病毒之间相对比较保守，合成数量众多，具有很强抗原性，在诱导宿主免疫应答甚至发病机制中发挥重要作用，常被用作冠状病毒诊断的抗原位点。但是现有的直接基于N蛋白作为抗原用于检测SARS-CoV-2的方法检出率低，影响COVID-19的确诊效率及疫情的控制。

发明内容

基于此，有必要针对现有的直接基于N蛋白作为抗原用于检测新型冠状病毒的方法检出率低，影响新型冠状病毒肺炎的确诊效率及疫情的控制的问题，提供一种基于核衣壳蛋白的融合蛋白的新型冠状病毒检测的试剂盒。

本发明提出的一种基于核衣壳蛋白的融合蛋白的新型冠状病毒检测的试剂盒，所述试剂盒包括用于新型冠状病毒检测的抗原，所述用于新型冠状病毒检测的抗原包括基于核衣壳蛋白的融合蛋白。

在其中的一个实施例中，所述基于核衣壳蛋白的融合蛋白为核衣壳蛋白的氨基酸序列或部分氨基酸序列与二硫化物氧化还原酶A的氨基酸序列或部分氨基酸序列融合表达生成的融合蛋白；或，核衣壳蛋白的氨基酸序列或部分氨基酸序列与二硫化物氧化还原酶C的氨基酸序列或部分氨基酸序列融合表达生成的融合蛋白。

在其中的一个实施例中，所述二硫化物氧化还原酶A的氨基酸序列为如SEQ IDNo.1所示的氨基酸序列或如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的突变序列；

所述二硫化物氧化还原酶C的氨基酸序列为如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列或如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列的突变序列；

所述核衣壳蛋白的氨基酸序列为如SEQ ID No.3所示的氨基酸序列或如SEQ IDNo.3所示的氨基酸序列的突变序列。

在其中的一个实施例中，所述核衣壳蛋白的氨基酸序列与所述二硫化物氧化还原酶A的氨基酸序列的C端直接连接或通过接头连接；所述核衣壳蛋白的氨基酸序列与所述二硫化物氧化还原酶C的氨基酸序列的C端直接连接或通过接头连接。