[发明专利]适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂及其制备方法和应用在审
申请号: | 202011246517.0 | 申请日: | 2020-11-10 |
公开(公告)号: | CN112522111A | 公开(公告)日: | 2021-03-19 |
发明(设计)人: | 刘海明;李硕;姜秀娟;吕中文;程淑琴;杜蓉蓉 | 申请(专利权)人: | 北京航天恒丰科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N1/20;A01N63/22;A01N63/38;A01P3/00;A01P21/00;C12R1/885;C12R1/07 |
代理公司: | 北京鸿元知识产权代理有限公司 11327 | 代理人: | 王守梅;袁文婷 |
地址: | 102433 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 适用于 柑橘 枯萎病 微生物 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂由解淀粉芽孢杆菌菌剂和哈茨木霉菌菌剂组成;所述适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂中的解淀粉芽孢杆菌和哈茨木霉菌有效活菌数均不少于1.0*1011CFU/g。
2.根据权利要求1所述的适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂,其特征在于,所述解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌FZB42菌株。
3.根据权利要求1所述的适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂,其特征在于,所述解淀粉芽孢杆菌菌剂和哈茨木霉菌菌剂的重量比为2~3:1。
4.权利要求1-3所述的微生物菌剂在柑橘枯萎病中的应用。
5.一种适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,
将解淀粉芽孢杆菌活化后,接种到解淀粉芽孢杆菌的液体种子培养基中培养以获得解淀粉芽孢杆菌发酵种子液;其中,解淀粉芽孢杆菌菌量为1*108CFU/ml;
将哈茨木霉菌活化后,接种到哈茨木霉菌液体种子培养基中培养以获得哈茨木霉菌发酵种子液;其中,哈茨木霉菌菌液孢子浓度调至1*106个/ml;
按重量比称取51%的稻草、25.5%的麦麸、1.5%米糠、21.5%的贝壳粉和0.5%的(NH4)2SO4混合形成发酵料,加水使发酵料的含水率至75%,搅拌均匀后装入聚丙烯菌袋,每袋150g,121℃灭菌20min,获得灭菌后的发酵料;
向灭菌后的发酵料中加入3ml解淀粉芽孢杆菌发酵种子液及5ml哈茨木霉菌发酵种子液,室温发酵12天;培养12天后,对发酵产物进行干燥,通过筛分将发酵料与分生孢子分离,收集孢子粉并于4℃条件下保存,获得解淀粉芽孢杆菌与哈茨木霉菌的混合菌剂。
6.根据权利要求5所述的适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,将4℃保存的解淀粉芽孢杆菌和哈茨木霉菌分别用NA和PDA平板活化,于28℃恒温培养箱中分别培养2天和5天;将解淀粉芽孢杆菌接种到BYP液体培养基中,28℃、180转/min的恒温振荡培养箱中培养2天;将长满孢子的哈茨木霉菌株每平板加10ml灭菌生理盐水,用涂布器将孢子囊挂下接种到PDB培养基中,28℃、180转/min恒温振荡培养箱中培养5天。
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