[发明专利]适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂及其制备方法和应用

说明书

本发明提出适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂及其制备方法和应用，涉及高效农业技术领域。通过将解淀粉芽孢杆菌菌剂和哈茨木霉菌菌剂组成的混合物作为防治柑橘枯萎病的微生物菌剂。本发明的适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂不仅可以促进柑橘的根系的生长，而且解淀粉芽孢杆菌和哈茨木霉菌混合菌剂的促生效果要优于单独接种解淀粉芽孢杆菌菌剂或哈茨木霉菌菌剂。

技术领域

本发明涉及高效农业技术领域，尤其涉及一种适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂及其制备方法和应用。

背景技术

植物枯萎病是一种世界性的真菌土传病害，病原菌从根部为害植物，侵染维管束，逐渐向上延伸，阻塞营养物质输送，致使植株在短期内枯萎死亡。

现有的柑橘枯萎病的防治方法为通过使用春雷霉素、嗪霉素悬浮剂、盐酸土霉素溶液等药剂对柑橘果树进行灌根、蘸根处理；但是，存在的弊端如下：

1、枯萎病的防治效果不太理想；2、化学残留较高。

所以，亟需一种能够防治柑橘枯萎病的微生物菌剂。

发明内容

鉴于上述问题，本发明提供一种防治柑橘枯萎病效果较好的微生物菌剂及其制备方法和应用。

为实现上述目的，一种适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂，所述微生物菌剂由解淀粉芽孢杆菌菌剂和哈茨木霉菌菌剂组成；所述适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂中的解淀粉芽孢杆菌和哈茨木霉菌有效活菌数均不少于1.0*10¹¹CFU/g。

优选的，所述解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌FZB42菌株。

优选的，所述解淀粉芽孢杆菌菌剂和哈茨木霉菌菌剂的重量比为2～3:1。

本发明还保护所述微生物菌剂在柑橘枯萎病中的应用。

本发明还保护一种适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂的制备方法，方法包括：将解淀粉芽孢杆菌活化后，接种到解淀粉芽孢杆菌的液体种子培养基中培养以获得解淀粉芽孢杆菌发酵种子液；其中，解淀粉芽孢杆菌菌量为1*10⁸CFU/ml；将哈茨木霉菌活化后，接种到哈茨木霉菌液体种子培养基中培养以获得哈茨木霉菌发酵种子液；其中，哈茨木霉菌菌液孢子浓度调至1*10⁶个/ml；

按重量比称取51％的稻草、25.5％的麦麸、1.5％米糠、21.5％的贝壳粉和0.5％的(NH₄)₂SO₄混合形成发酵料，加水使发酵料的含水率至75％，搅拌均匀后装入聚丙烯菌袋，每袋150g，121℃灭菌20min，获得灭菌后的发酵料；

向灭菌后的发酵料中加入3ml解淀粉芽孢杆菌发酵种子液及5ml哈茨木霉菌发酵种子液，室温发酵12天；培养12天后，对发酵产物进行干燥，通过筛分将发酵料与分生孢子分离，收集孢子粉并于4℃条件下保存，获得解淀粉芽孢杆菌与哈茨木霉菌的混合菌剂。

优选的，将4℃保存的解淀粉芽孢杆菌和哈茨木霉菌分别用NA和PDA平板活化，于28℃恒温培养箱中分别培养2天和5天；将解淀粉芽孢杆菌接种到BYP液体培养基中，28℃、180转/min的恒温振荡培养箱中培养2天；将长满孢子的哈茨木霉菌株每平板加10ml灭菌生理盐水，用涂布器将孢子囊挂下接种到PDB培养基中，28℃、180转/min恒温振荡培养箱中培养5天。

本发明具有益效果如下：

本发明所提供的适用于柑橘枯萎病的微生物菌剂及其制备方法和应用，是通过解淀粉芽孢杆菌菌剂和哈茨木霉菌菌剂的混合物作为微生物菌剂，不仅可以促进了柑橘的根系的生长，而且解淀粉芽孢杆菌菌剂和哈茨木霉菌菌剂的促生效果要优于单独接种解淀粉芽孢杆菌菌剂或哈茨木霉菌菌剂，因此证明在防治柑橘枯萎病方面解淀粉芽孢杆菌和哈茨木霉菌存在协同作用。

附图说明