[发明专利]一种对目标基因进行干扰的系统和方法有效
申请号: | 202011249720.3 | 申请日: | 2020-11-10 |
公开(公告)号: | CN112322656B | 公开(公告)日: | 2022-08-19 |
发明(设计)人: | 刘志国;牟玉莲;李奎;刘颖 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/65;C12N15/90 |
代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 徐乐 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 目标 基因 进行 干扰 系统 方法 | ||
1.一种对目标基因进行干扰的系统,其特征在于,包括dCpf1-PS融合蛋白、具有PS转座酶识别序列对的Donor载体,以及引导RNA;
所述Donor载体的转基因序列如SEQ ID NO.3所示;
所述Donor载体在PS转座酶识别序列对的两侧分别含有目标基因的同源臂序列;
左同源臂序列如SEQ ID NO.5所示,右同源臂序列如SEQ ID NO.6所示;所述目标基因为猪ROSA26基因;
所述引导RNA序列如SEQ ID NO.4所示。
2.权利要求1所述的系统在对目标基因进行非疾病治疗目的的定点整合或干扰目标基因表达中的应用;
所述目标基因为猪ROSA26基因。
3.一种对目标基因进行非疾病治疗目的干扰的方法,其特征在于,采用权利要求1所述的系统对目标基因进行编辑;
所述目标基因为猪ROSA26基因。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述方法包括将(a)、(b)和(c)导入生物细胞中,对目标基因进行编辑:
(a)靶向目标基因的引导RNA或可以表达引导RNA的生物材料;
(b)Donor载体;
(c)dCpf1-PS融合蛋白或可以表达dCpf1-PS融合蛋白的生物材料;
所述生物细胞包括猪源细胞或猪源胚胎。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述目标基因为猪ROSA26基因第1内含子。
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