[发明专利]燕麦糖基转移酶AsUGT73E5及其在甾体皂苷合成中的应用

权利要求书

1.一种糖基转移酶，是如下a1或a2所述的蛋白质：

a1.氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的蛋白质；

a2.将SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加而形成的具有糖基转移酶活性的蛋白质。

2.编码权利要求1所述的糖基转移酶的基因。

3.根据权利要求2所述的基因，其特征在于：所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

4.含有权利要求2或3所述基因的表达盒、载体或重组菌。

5.权利要求1所述的糖基转移酶的制备方法，包括如下步骤：构建权利要求2或3所述基因的表达载体，将表达载体导入表达宿主菌中，获得重组菌，培养重组菌并诱导蛋白表达，收集菌体，提取和纯化蛋白。

6.权利要求1所述的糖基转移酶在糖基转移反应中的用途。

7.权利要求1所述的糖基转移酶在甾体皂苷合成中的用途。

8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述甾体皂苷合成中采用薯蓣皂苷元、偏诺皂苷元或纽阿替皂苷元，在所述糖基转移酶的作用下引入葡萄糖基，从而产生相应的甾体皂苷。

9.一种合成重楼皂苷V的方法，包括如下步骤：利用权利要求1所述的糖基转移酶与薯蓣皂苷元、UDP-Glc反应生成延龄草苷；然后以延龄草苷为底物，加入氨基酸序列如SEQ IDNO:3所示的糖基转移酶和UDP-Rha继续反应，生成重楼皂苷V。

10.一种合成重楼皂苷Ⅵ的方法，包括如下步骤：利用权利要求1所述的糖基转移酶与偏诺皂苷元、UDP-Glc反应生成偏诺皂苷元-3-O-葡糖苷；然后以偏诺皂苷元-3-O-葡糖苷为底物，加入氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的糖基转移酶和UDP-Rha继续反应，生成重楼皂苷Ⅵ。