[发明专利]一种天然PPARγ受体激动剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种天然PPARγ受体激动剂熊果酸的制备方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：

步骤1：制备山茱萸提取物；制备过程如下：

步骤1.1：将山茱萸阴干粉碎之后，以75％的工业乙醇提取得总浸膏；

步骤1.2：将步骤1.1得到的浸膏充分分散到水里，用3倍体积的石油醚脱脂，得石油醚部位；

步骤1.3：将步骤1.2得到的萃余相加入3倍体积的乙酸乙酯萃取，旋干得到乙酸乙酯部位；

步骤2：将步骤1得到的山茱萸提取物进行分离纯化得到受体激动剂；具体为：

步骤2.1：将步骤1.3得到的乙酸乙酯提取物溶解，加入200-300目的硅胶搅拌均匀混合，乙酸乙酯提取物和硅胶的质量比为1:1，待溶剂挥发完样品干燥后，用研钵把样品磨成粉末备用；

步骤2.2：在色谱柱依次加入不同浓度梯度的石油醚-乙酸乙酯及乙酸乙酯-甲醇进行梯度洗脱，每个浓度冲6L溶剂；

步骤2.3：将步骤2.2中各个浓度梯度的流出液用旋转蒸发仪转干；

步骤2.4：对步骤2.3中各个部分采用TLC薄层板点板，紫外灯，硫酸乙醇显色情况，对分离得到的组分合并，最终合并为6个组分，标记为Fr.1：PE:EA＝80:20和60:40，27.7g、Fr.2：PE:EA＝40:60，2.2g、Fr.3：PE:EA＝20:80，135.7g、Fr.4：EA 100％，299.4g、Fr.5：EA:MeOH＝80:20，156.6g、Fr.6：EA:MeOH＝60:4，0→0:100，15.1g；

步骤2.5：将Fr.1和Fr.2合并后，以硅胶为固定相，采用梯度洗脱剂进行洗脱并收集，收集后使用旋转蒸发仪转干，分别收集并作好标记，将各个组分进行TLC点板，并在紫外灯下观察点板结果，再使用硫酸乙醇或碘试剂显色，根据TLC薄层色谱板显示的比移值，将各所含化合物相近的组分进行合并，得到16个子组分：Fr.1-1、Fr.1-2、Fr.1-3、Fr.1-4、Fr.1-5、Fr.1-6、Fr.1-7、Fr.1-8、Fr.1-9、Fr.1-10、Fr.1-11、Fr.1-12、Fr.1-13、Fr.1-14、Fr.1-15、Fr.1-16；

步骤2.6：对Fr.1-6先应用反相高效液相色谱进行梯度洗脱分离，以含0.1％的甲酸的水和甲醇为洗脱剂，在40min内按此时间程序85:15→65:35，v/v，接着在20min内65:35→0:100、4mL/min设置的比例进行梯度洗脱，在保留时间为23.4min时收集到一个组分，将此组分进一步应用反相氨基柱色谱进行梯度洗脱分离：以含0.1％的甲酸的水和甲醇为洗脱剂，在40min内按此时间程序80:20→65:35，v/v，接着在20min内65:35→0:100、4mL/min得到化合物1，所述化合物1经核磁谱图和质谱鉴定为熊果酸。

2.根据权利要求1所述的一种天然PPARγ受体激动剂熊果酸的制备方法，其特征在于，所述步骤2.2中石油醚与乙酸乙酯的体积比依次为80:20、60:40、40:60、20:80和100％的乙酸乙酯，所述乙酸乙酯和甲醇的体积比依次为80:20、60:40、40:60、20:80和100％的甲醇。