[发明专利]用于治疗COVID-19感染的抗S1蛋白受体结合域多克隆抗体

权利要求书

1.快速分离获取用以制备抗S1蛋白受体结合域的多克隆抗体的血浆的方法，该方法是将取自人的外周血使用封闭式多细胞组分自动化分离系统分离成三个组分层：红细胞层、细胞浓缩层、血浆层，接着将得到血浆进行病毒灭活，任选地将该血浆在-20℃以下冻存，得到可用于制备抗S1蛋白受体结合域的多克隆抗体的血浆；该方法包括如下步骤：

(1)、通过静脉穿刺法采集的SARS-CoV-2自然感染者并通过血清抗体滴度/血清中和抗体滴度确认后的康复者的外周血250mL，，置血液采集袋内，该采集袋内装有抗凝剂，将血液采集袋置于水平摇床上充分混匀15min；

(2)、使用封闭式多细胞组分自动化分离系统，将一次性使用分离杯的塑料针头插入到血液采集袋上的无菌接口内，将采血袋挂起，使其中的40mL血液自然流入分离杯内的中央舱室；在加入血液前所述中央舱室内预先添加有0.4mL分离助剂；用无菌接合仪焊接管路将血液采集袋与一次性分离杯分离，再使该一次性分离杯置于水平摇床上充分混匀10min；所述分离助剂是包含油酸钠和硫酸镁的灭菌水溶液，其中油酸钠浓度为5%，硫酸镁以镁离子计为0.25mol/L；所述封闭式多细胞组分自动化分离系统是ThermoGenesis Corp.生产的PXP® System；

(3)、将一次性分离杯配平后放置于可编程的离心机进行离心操作，并按照如下程序设定离心机的参数：

在离心的初始高速部分即2000RCF期间，外周血样本中的细胞通过密度分层在一次性使用分离杯中分为三个组分：红细胞层、细胞浓缩层、血浆层；

将速度降低至50RCF，并且在此第一次低速离心期间，大部分红细胞被引导至红细胞回收舱；

短暂增加速度至500RCF，以进一步将处理室中的细胞分层；

再次降低至50RCF，进一步除去红细胞；

在采集血浆之前，相对离心力短暂增加至250RCF，在此期间，细胞浓缩层和血浆进一步分层；

再次降低至50RCF，细胞浓缩层通过输送管转移至回收舱室，使大部分血浆保留在中央舱室中；

(4)、离心机减速并停止旋转，在一次性分离杯中分别单独采集红细胞、细胞浓缩层、血浆；

(5)、利用无菌接管机连接一次性分离杯上中央舱室的管路和转移袋的管路，将中央舱室中的分离后的血浆转移至转移袋内；用无菌接合仪焊接管路后，将分离后的血浆用亚甲蓝光化学法病毒灭活，然后在6h内快速冻结至-20℃以下，保存，得到血浆，其备用于制备抗S1蛋白受体结合域的多克隆抗体的制剂。

2.根据权利要求1的方法，其所获得的血浆丙氨酸氨基转移酶活性低于40U/L。

3.根据权利要求1的方法，其所获得的血浆之HbsAg、梅毒、HIV-I、HIV-II抗体、HCV抗体用经批准的检测试剂盒检测后为阴性。

4.根据权利要求1的方法，其所获得的血浆中，蛋白质含量高于50g/L。

5.根据权利要求1的方法，所述采集袋内的抗凝剂为枸橼酸钠。

6.根据权利要求1的方法，所述分离助剂是照如下方法配制的：将规定量的油酸钠和硫酸镁溶解于注射用水中，用0.45µm微孔滤膜过滤，封装于玻璃瓶中，121°C热压灭菌15min，即得。