[发明专利]用于治疗COVID-19感染的抗S1蛋白受体结合域多克隆抗体

说明书

本发明涉及用于治疗COVID‑19感染的抗S1蛋白受体结合域多克隆抗体。其一方面提供制备抗S1蛋白受体结合域的多克隆抗体制剂的方法，包括步骤：提供S1受体蛋白抗原‑抗体亲和层析柱；利用封闭式多细胞组分自动化分离系统快速分离外周血以获得血浆组分；使所得血浆使用S1受体蛋白抗原‑抗体亲和层析柱进行多克隆抗体的制备和纯化，得到抗S1蛋白受体结合域的多克隆抗体制品。另一方面涉及快速分离获取用以制备抗S1蛋白受体结合域的多克隆抗体的血浆的方法，其将取自人的外周血使用封闭式多细胞组分自动化分离系统分离，得到可用于制备抗S1蛋白受体结合域的多克隆抗体的血浆。本发明方法呈现如说明书所述优异技术效果。

技术领域

本发明属于医药生物技术领域，具体的，涉及一种从全血中快速分离成分血浆用以制备抗S1蛋白受体结合域的多克隆抗体的方法。特别涉及一种使用封闭式多细胞组分自动化分离系统快速提取COVID-19患者康复期血浆并制备抗S1蛋白受体结合域的多克隆抗体的方法。尤其是涉及使用封闭式多细胞组分自动化分离系统即MulticomponentAutomated Cell Separation System(MACSS，ThermoGenesis Corp.)从全血中快速分离成分血浆用以制备抗S1蛋白受体结合域的多克隆抗体的方法。该抗S1蛋白受体结合域的多克隆抗体可用于新型冠状病毒COVID-19感染患者的治疗。本发明还涉及用于治疗COVID-19感染的抗S1蛋白受体结合域多克隆抗体。

背景技术

2019冠状病毒病(Coronavirus Disease 2019，COVID-19)也称新型冠状病毒，是由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus2，SARS-CoV-2)所致疾病，潜伏期为1～14d，多为3～7d。临床表现流感样症状，以发热、干咳、乏力为主要表现。根据症状严重程度，临床分为轻型、普通型、重型和危重型。重症病例多在1周后出现呼吸困难，危重型患者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒、出凝血功能障碍及多器官功能衰竭等，严重者可导致患者死亡。

冠状病毒Spike蛋白(Spike glycoprotein，S glycoprotein，亦称S蛋白)由1160～1400个氨基酸组成，包含21～35个N-糖基化位点。S蛋白以三聚体的形式在病毒表面形成特殊的花冠结构。S蛋白在宿主细胞蛋白酶的作用下被裂解为S1和S2两部分，S1主要功能是与宿主细胞表面受体结合，S2亚基介导病毒-细胞、细胞-细胞膜融合。冠状病毒主要通过S1蛋白与宿主细胞受体结合介导病毒的入侵并决定病毒组织或宿主嗜性。2019-nCoV和SARS病毒一样，都是通过识别人类宿主的ACE2蛋白从而进入细胞的，尤其是，S蛋白结构域的细胞受体结合域(Receptor binding domain，RBD)直接参与了宿主受体的识别，该区域的氨基酸变异会导致病毒的种属嗜性和感染特性的变化，因此，这一区是COVID-19亚基疫苗和抗体药物研究中的重要靶序列之一。

随着恢复期血浆被成功的用于治疗多种急性病毒性传染病，如在埃博拉、严重急性呼吸综合症(SARS)病毒和中东呼吸综合征(MERS)病毒流行时均曾制备恢复者的血浆用于治疗或医学研究，其独到的治疗技术优势越来越受到肯定和认同，针对新型冠状病毒目前虽暂无特异性药物治疗，但发现新型冠状病毒肺炎康复者体内有高滴度抗体，能对抗新冠病毒，可以降低患者体内的病毒含量，其中有些可能会中和病毒并防止新一轮感染。康复者血浆中特异性抗体可中和患者体内SARS-CoV-2病毒，有助于改善患者临床症状和预后转归。新型冠状病毒肺炎康复者血浆治疗的目的是使新型冠状病毒感染者，在当前没有特效药物治疗的情况下，达到对症和支持疗法，尤其是重型和危重型患者能减轻症状，提高患者的活动耐力。