[发明专利]MrgD免疫抗原片段、MrgD抗体及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 202011259592.0 | 申请日： | 2020-11-12 |
| 公开（公告）号： | CN112409473B | 公开（公告）日： | 2022-05-03 |
| 发明（设计）人： | 李鹏;吴晓光;赵锟;毛宇康;孔祥清 | 申请（专利权）人： | 江苏省人民医院（南京医科大学第一附属医院） |
| 主分类号： | C07K14/72 | 分类号： | C07K14/72;C07K16/28;G01N33/68;G01N33/58;G01N33/577 |
| 代理公司： | 南京禾易知识产权代理有限公司 32320 | 代理人： | 王彩君 |
| 地址： | 210029 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | mrgd 免疫 抗原 片段 抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种MrgD免疫抗原片段，其序列为：Ser Ser Pro Ala Pro Gly Leu Thr Ile SerPro Thr Met Asp Cys。
2.一种MrgD抗体的制备方法，其步骤包括：
（1）合成多肽片段Ser Ser Pro Ala Pro Gly Leu Thr Ile Ser Pro Thr Met AspCys；
（2）将步骤（1）合成的多肽片段注入动物体内进行免疫，
（3）取免疫后的动物脾脏，制成脾细胞，将脾细胞与骨髓瘤细胞融合后进行培养；
（4）取融合培养细胞，用包被MrgD蛋白的间接ELISA法筛选出滴度最高且为单克隆的细胞株进行扩大培养；
（5）将扩大培养的杂交瘤细胞注入同种动物体内，收集腹水，离心取上清液；
（6）腹水上清液通过蛋白G微球柱,洗脱纯化后获得MrgD抗体。
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