[发明专利]一种9羟基雄烯二酮的制备方法在审
申请号: | 202011260933.6 | 申请日: | 2020-11-12 |
公开(公告)号: | CN112359087A | 公开(公告)日: | 2021-02-12 |
发明(设计)人: | 杨芳;唐杰;刘喜荣;孟浩;曾春玲;赵小娟 | 申请(专利权)人: | 湖南新合新生物医药有限公司 |
主分类号: | C12P33/00 | 分类号: | C12P33/00;C12R1/34 |
代理公司: | 北京风雅颂专利代理有限公司 11403 | 代理人: | 曾志鹏 |
地址: | 415400 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 羟基 雄烯二酮 制备 方法 | ||
1.一种9羟基雄烯二酮的制备方法,其特征是,包括如下步骤,
1)将植物甾醇、二氯甲烷和四甲基哌啶氮氧化物混合,搅拌,得到原料体系;控制温度为10-20℃,将溴化钠和碳酸氢钠混合物水溶液滴加到上述原料体系中,滴加完毕后,滴加次氯酸钠溶液,反应完全后,终止反应,处理,得到植物甾醇中间体;所述植物甾醇为菜籽甾醇、菜油甾醇、豆甾醇或β-谷甾醇,植物甾醇中间体的结构式为:
R为
2)将植物甾醇中间体在耻垢分枝杆菌Mycobacterium smegmatis作用下进行生物转化,得到9羟基雄烯二酮,耻垢分枝杆菌Mycobacterium smegmatis的保藏编号为CCTCC NO:M2013544。
2.如权利要求1所述的9羟基雄烯二酮的制备方法,其特征是,植物甾醇和二氯甲烷的重量体积比为1g:(3-4)ml。
3.如权利要求1所述的9羟基雄烯二酮的制备方法,其特征是,植物甾醇和四甲基哌啶氮氧化物的重量比为1:0.01。
4.如权利要求1所述的9羟基雄烯二酮的制备方法,其特征是,溴化钠和碳酸氢钠混合物水溶液中,溴化钠的重量浓度为10%。
5.如权利要求1-4任一项所述的9羟基雄烯二酮的制备方法,其特征是,溴化钠和碳酸氢钠混合物水溶液中,碳酸氢钠的重量浓度为3%。
6.如权利要求1-4任一项所述的9羟基雄烯二酮的制备方法,其特征是,次氯酸钠溶液的浓度为10%。
7.如权利要求6所述的9羟基雄烯二酮的制备方法,其特征是,植物甾醇和次氯酸钠溶液的重量比为1:3。
8.如权利要求1-4任一项所述的9羟基雄烯二酮的制备方法,其特征是,终止反应的方式为,加入硫代硫酸钠水溶液。
9.如权利要求1-4任一项所述的9羟基雄烯二酮的制备方法,其特征是,植物甾醇中间体在耻垢分枝杆菌Mycobacterium smegmatis作用下进行生物转化的步骤为,将耻垢分枝杆菌接种到转化培养基中,转化完全后,处理,得到9羟基雄烯二酮;所述转化培养基重量配方为,植物甾醇中间体2-4%,大豆油15-20%,玉米浆5-8%,硝酸钠5-6%,磷酸氢二铵0.05-0.08%,pH为8。
10.如权利要求9所述的9羟基雄烯二酮的制备方法,其特征是,耻垢分枝杆菌的种子培养基为酵母膏粉10g/L,葡萄糖15g/L,硝酸钠0.54%,磷酸氢二铵0.06%,pH=7.5。
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