[发明专利]一种覆膜酵母发酵物的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种覆膜酵母发酵物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：配制培养基

1)一级种子培养基用YPD培养基

YPD培养基：将10g覆膜酵母提取物，20gYNB，20g葡萄糖，溶于1000mL去离子水中，115℃高压灭菌，备用；

2)发酵表达培养基用BSM培养基

BSM培养基:在1L去离子水中按以下顺序依次分别溶解下列物质：26.7ml85％磷酸85％，18.2g硫酸钾，14.9g七水硫酸镁，0.93g二水硫酸钙，4.13g氢氧化钾；使用25％的氨水调节pH至5.5，添加0.2％的YNB；

步骤2：发酵表达

1)取已鉴定活性的阳性菌落，接种于已经灭菌的200mL YPD培养基的挡板瓶中，在29℃，200rpm的条件下振荡培养24小时，使其在600nm波长处的吸光值达到4-6；

2)在种子菌发酵罐中加入YPD培养基和适量消泡剂，在115℃下，灭菌30min；

3)使用火焰接种法将挡板瓶中的种子液接入到种子菌发酵罐中，调整发酵参数，发酵12h；

4)在诱导表达发酵罐中加入改良BSM培养基和适量消泡剂，121℃，20min灭菌；

5)转接管路高压蒸汽灭菌15min后，将种子发酵罐中的种子液按照1:30的量转入诱导表达发酵罐中，调整发酵参数，开始发酵；

6)发酵6h后开始流加甲醇，发酵，72h后得到发酵产物即为覆膜酵母发酵物。

2.根据权利要求1所述的覆膜酵母发酵物的应用，其特征在于，使用覆膜酵母发酵物生产敷料或面膜。

3.根据权利要求2所述的覆膜酵母发酵物的应用，其特征在于，

所述敷料的制备方法包含以下步骤：

1)将覆膜酵母发酵液按20％比例的添加量与滤液混合，在混合液中加入总质量0.5％的卡波姆，均质10min；

2)接着转入搅拌罐中，加入总质量3％的甘油，高速搅拌；

3)缓慢滴入三乙醇胺，直到pH超过6，卡波姆形成凝胶，得到所述敷料。

4.根据权利要求2所述的覆膜酵母发酵物的应用，其特征在于，所述面膜包括面膜基布和面膜精华液，所述面膜精华液按重量百分含量计，包括以下组分：

卡波姆:0.15-1.5％、高分子透明质酸：0.1-1％、低分子透明质酸：0.1-1％、甘油：5％、覆膜酵母发酵物：15-20％、三乙醇胺：0.15％、覆膜酵母发酵液2.5-5％、余量：纯化水；

所述面膜的制备方法包含以下步骤：

1)覆膜酵母发酵物活性检测；

2)在容器中加入纯化水；

3)向容器中依次加入卡波姆、高分子透明质酸、低分子透明质酸，搅拌10分钟至分散均匀；

4)将步骤3的液体加入均质机中，温度维持在60-75℃，均质机进行高速均质10分钟，至整个体系澄清透明，无颗粒状固体成分，冷却至室温；

5)向容器中加入甘油，充分搅拌10分钟至均匀；

6)加入覆膜酵母发酵物，充分搅拌10分钟至均匀；

8)加入覆膜酵母发酵液，充分搅拌10分钟至均匀；

9)向容器中缓慢加入三乙醇胺，边加入边搅拌，搅拌均匀；

10)采用135℃高温瞬时灭菌，质检合格后填充装有面膜基布的袋中。