[发明专利]一种检测甲草胺的试纸条及其应用有效

专利信息
申请号: 202011266446.0 申请日: 2020-11-13
公开(公告)号: CN112462070B 公开(公告)日: 2023-07-11
发明(设计)人: 王兆芹;马玉华;贾芳芳;王琳琛;万宇平;何方洋 申请(专利权)人: 北京望尔生物技术有限公司;北京勤邦科技股份有限公司
主分类号: G01N33/58 分类号: G01N33/58;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/53
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地址: 102206 北京市昌平*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 检测 甲草胺 试纸 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种检测甲草胺的试纸条,包括样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)和底板(7),其特征在于所述反应膜上具有包被有甲草胺半抗原-载体蛋白偶联物的检测线(5)和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线(6),所述结合物释放垫(2)喷涂有甲草胺单克隆抗体-胶体金标记物,所述甲草胺半抗原-载体蛋白偶联物由甲草胺半抗原与载体蛋白偶联得到,所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白、人血清白蛋白,所述甲草胺半抗原的制备方法如下:

取化合物a 2.07g,加乙腈100ml溶解,加无水碳酸钾1.38g,充分搅拌,加无水碘化钠0.27g,加氯甲基甲基醚0.81g,充分搅拌后,60℃反应2h,停止反应,旋蒸除去乙腈,加水180ml,加乙酸乙酯200ml萃取,静置,分去水相,旋蒸蒸干,得到黄色油状物,加体积比为5:1的正己烷/乙酸乙酯70ml重结晶,得到化合物c 2.4g,收率95.62%;取化合物c 2.4g,加二氯甲烷100ml溶解,加PDC 3.76g,搅拌混匀,加冰乙酸1.5ml,室温搅拌4h,停止反应,抽滤,除去不溶物,滤液加水100ml充分震荡,静置,分去水相,浓缩蒸干,得到红色油状物,上硅胶柱,体积比为3:1的石油醚/乙酸乙酯洗脱分离,得到化合物d 1.9g,收率85.2%;取化合物d1.9g,加1,2-二氯乙烷70ml溶解,加3.5ml三乙胺,加一氯代乙酰氯0.95g,室温搅拌4h,停止反应,加水100ml充分震荡,静置,分去水相有机相蒸干,上硅胶柱,体积比为10:1的二氯甲烷/甲醇洗脱分离,得到化合物e丙醛-甲草胺1.45g,收率54.88%,即为半抗原产物;

所述甲草胺半抗原的制备图如下:

2.如权利要求1所述的试纸条,其特征在于所述样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)依次粘贴在底板(7)上。

3.如权利要求1所述的试纸条,其特征在于所述结合物释放垫1/3~1/2被覆盖于样品吸收垫下。

4.如权利要求1所述的试纸条,其特征在于所述甲草胺单克隆抗体是以甲草胺半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得,所述羊抗鼠抗抗体是将鼠源抗体免疫羊得到。

5.一种制备权利要求1-4任一项所述试纸条的方法,其包括步骤:

1)制备喷涂有甲草胺单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫;

2)制备具有包被有甲草胺半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线的反应膜;

3)将1)和2)制备好的结合物释放垫、反应膜与样品吸收垫、吸水垫和底板组装成试纸条。

6.一种检测农作物中甲草胺残留的方法,其包括步骤:

1)用权利要求1-4任一项所述的试纸条进行检测;

2)分析检测结果。

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