[发明专利]检测16p11.2微缺失的引物探针组合物、试剂盒及其应用

权利要求书

1.检测16p11.2微缺失的引物探针组合物，其特征在于，所述引物探针组合物检测染色体16p11.2上32.5~33.8 M区域的缺失突变；

所述引物探针组合物包括（a）~（e）：

（a）检测第一缺失区段F1R1的引物探针：

上游引物SEQ ID NO: 1：GGGTCAGAGCATGTGCATAA；

下游引物SEQ ID NO: 2：CACAGAGAATCAGGGAGAAAGG；

探针SEQ ID NO: 3：CTGCATCAGGTTCTGGGCTCCA；

（b）检测第二缺失区段F2R2的引物探针：

上游引物SEQ ID NO: 4：CTAATGTTGACCAGGGAGCTATG；

下游引物SEQ ID NO: 5：AGATGAGGGCCTAGCAGATTA；

探针SEQ ID NO: 6：TCTTGTGGCCAGCTTCAGAGAACC；

（c）检测第三缺失区段F3R3的引物探针：

上游引物SEQ ID NO: 7：TGGGAGGAGAGTGTGGTAAA；

下游引物SEQ ID NO: 8：GTGGATACACGCAGACAAAGA；

探针SEQ ID NO: 9：AGCAGAGGTCTAAACTGGGTGTCTCT；

（d）检测第四缺失区段F4R4的引物探针：

上游引物SEQ ID NO: 10：GTGGAGTCAGGAGCTTTGTT；

下游引物SEQ ID NO: 11：GTCTTAGGCTTTGGCCTCTC；

探针SEQ ID NO: 12：AGTGCTGGGCATAGTGAGAAGTCA；

（e）检测第五缺失区段F5R5的引物探针：

上游引物SEQ ID NO: 13：GGGAGCAAGGCATCTTACA；

下游引物SEQ ID NO: 14：CTTGTGCTGTCTTGCGATAAC；

探针SEQID NO: 15：AGAACAGGAGCAACACAGAGAGCG。

2.根据权利要求1所述的引物探针组合物，其特征在于，所述检测染色体16p11.2上32.5~33.8 M区域的缺失突变的探针的5’端修饰有荧光基团，3’端修饰有荧光淬灭基团。

3.一种检测16p11.2微缺失的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1或2所述的引物探针组合物。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括检测内参基因的引物探针。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述内参基因的引物探针为检测EFTUD2的引物探针；

所述EFTUD2的引物探针包括：

上游引物SEQ ID NO: 16：GGTCTTGCCAGACACCAAAG；

下游引物SEQ ID NO: 17：TGAGAGGACACACGCAAAAC；

探针SEQ ID NO: 18：GGACATCCTTTGGCTTTTGA。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述检测EFTUD2的探针的5’端修饰有荧光基团，3’端修饰有荧光淬灭基团。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述检测染色体16p11.2上32.5~33.8 M区域的缺失突变的探针的5’荧光基团和所述检测EFTUD2的探针的5’荧光基团不同。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括PCR缓冲液和/或去离子水；

所述试剂盒还包括阴性对照，所述阴性对照为染色体16p11.2上32.5~33.8 M未发生缺失突变的野生型基因。