[发明专利]高效率MMLV酶突变体有效
申请号: | 202011269318.1 | 申请日: | 2020-11-13 |
公开(公告)号: | CN114480329B | 公开(公告)日: | 2023-06-30 |
发明(设计)人: | 蒋析文;刘霭珊;陆雪兰;吴志坚 | 申请(专利权)人: | 广州达安基因股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/12 | 分类号: | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12Q1/70;C12Q1/6851;C12R1/19;C12R1/93 |
代理公司: | 上海助之鑫知识产权代理有限公司 31328 | 代理人: | 陈详 |
地址: | 510665 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高效率 mmlv 突变体 | ||
1.一种M-MLV酶突变体,其特征在于,所述M-MLV酶突变体在第313位氨基酸残基、第583位氨基酸残基、和第446位氨基酸残基发生突变;并且,第313位的氨基酸残基位点突变为Gln,第583位的氨基酸残基位点突变为Asn,第446位的氨基酸残基位点突变为Cys,其中氨基酸残基编号对应于SEQ ID NO.1所示的编号。
2.一种多核苷酸分子,其特征在于,所述多核苷酸分子编码权利要求1所述的M-MLV酶突变体。
3.一种载体,其特征在于,所述载体含有权利要求2所述的多核苷酸分子。
4.一种宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞含有权利要求3所述的载体或染色体整合有权利要求2所述的多核苷酸分子。
5.如权利要求4所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为原核细胞、或真核细胞。
6.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含权利要求1所述的M-MLV酶突变体。
7.一种制备权利要求1所述的M-MLV酶突变体的方法,其特征在于,包括步骤:
(i)在适合的条件下,培养权利要求4所述的宿主细胞,从而表达出所述的M-MLV酶突变体;和
(ii)分离所述的M-MLV酶突变体。
8.权利要求1所述的M-MLV酶突变体在制备逆转录检测试剂或逆转录试剂盒中的用途。
9.一种RNA逆转录方法,其特征在于,所述方法包括步骤:
(1)提供含有RNA的样品;
(2)逆转录反应:
使用权利要求1所述的逆转录酶突变体对步骤(1)提供的含有RNA的样品进行逆转录反应。
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