[发明专利]高效率MMLV酶突变体有效

专利信息
申请号: 202011269318.1 申请日: 2020-11-13
公开(公告)号: CN114480329B 公开(公告)日: 2023-06-30
发明(设计)人: 蒋析文;刘霭珊;陆雪兰;吴志坚 申请(专利权)人: 广州达安基因股份有限公司
主分类号: C12N9/12 分类号: C12N9/12;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12Q1/70;C12Q1/6851;C12R1/19;C12R1/93
代理公司: 上海助之鑫知识产权代理有限公司 31328 代理人: 陈详
地址: 510665 广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 高效率 mmlv 突变体
【权利要求书】:

1.一种M-MLV酶突变体,其特征在于,所述M-MLV酶突变体在第313位氨基酸残基、第583位氨基酸残基、和第446位氨基酸残基发生突变;并且,第313位的氨基酸残基位点突变为Gln,第583位的氨基酸残基位点突变为Asn,第446位的氨基酸残基位点突变为Cys,其中氨基酸残基编号对应于SEQ ID NO.1所示的编号。

2.一种多核苷酸分子,其特征在于,所述多核苷酸分子编码权利要求1所述的M-MLV酶突变体。

3.一种载体,其特征在于,所述载体含有权利要求2所述的多核苷酸分子。

4.一种宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞含有权利要求3所述的载体或染色体整合有权利要求2所述的多核苷酸分子。

5.如权利要求4所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为原核细胞、或真核细胞。

6.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含权利要求1所述的M-MLV酶突变体。

7.一种制备权利要求1所述的M-MLV酶突变体的方法,其特征在于,包括步骤:

(i)在适合的条件下,培养权利要求4所述的宿主细胞,从而表达出所述的M-MLV酶突变体;和

(ii)分离所述的M-MLV酶突变体。

8.权利要求1所述的M-MLV酶突变体在制备逆转录检测试剂或逆转录试剂盒中的用途。

9.一种RNA逆转录方法,其特征在于,所述方法包括步骤:

(1)提供含有RNA的样品;

(2)逆转录反应:

使用权利要求1所述的逆转录酶突变体对步骤(1)提供的含有RNA的样品进行逆转录反应。

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