[发明专利]一种猫杯状病毒VP1-VP2重组蛋白及其制备方法和应用在审
申请号: | 202011271159.9 | 申请日: | 2020-11-13 |
公开(公告)号: | CN112321722A | 公开(公告)日: | 2021-02-05 |
发明(设计)人: | 李晓光 | 申请(专利权)人: | 杭州亿米诺生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;G01N33/569;C12R1/19 |
代理公司: | 杭州信义达专利代理事务所(普通合伙) 33305 | 代理人: | 万景旺 |
地址: | 310018 浙江省杭州市杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 猫杯状 病毒 vp1 vp2 重组 蛋白 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种猫杯状病毒VP1-VP2重组蛋白,其特征在于,包括SEQ ID NO.1所示氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的重组蛋白,其特征在于,由SEQ ID NO.1所示氨基酸序列组成。
3.一种编码权利要求1或2所述重组蛋白的基因,其特征在于,包括SEQ ID NO.2所示核苷酸序列。
4.一种表达载体,其特征在于,包括权利要求3所述基因。
5.一种宿主细胞,其特征在于,含有权利要求4所述表达载体。
6.一种制备权利要求1或2所述重组蛋白的方法,其特征在于,包括诱导权利要求3所述宿主细胞进行蛋白表达的步骤。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述表达载体为pET30a,所述宿主细胞为大肠杆菌。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,诱导宿主细胞进行蛋白表达的步骤为:
S1,用含50μg/mL卡那霉素的LB培养基37℃培养所述大肠杆菌,
S2,当大肠杆菌培养液OD600至0.5-0.7时,用终浓度为1mM的IPTG进行诱导表达,诱导条件为:25℃,转速200rpm,4h;
S3,将培养液于4℃,7000rpm离心10min,收集菌体;
S4,用缓冲液Binding Buffer破碎菌体;
S5,超声破碎菌体,条件为:500w,超声2s,间隔5s,共80-120次;
S6,4℃,12000rpm离心30min收集上清,所述重组蛋白在上清中。
9.权利要求1或2所述的重组蛋白在制备用于检测猫杯状病毒抗体的试剂盒中的应用。
10.一种用于检测猫杯状病毒抗体的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1或2所述的重组蛋白。
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