[发明专利]一种用于鉴别DHAV-1野毒和疫苗弱毒的鉴别诊断方法有效
| 申请号： | 202011272129.X | 申请日： | 2020-11-13 |
| 公开（公告）号： | CN112266984B | 公开（公告）日： | 2022-05-24 |
| 发明（设计）人： | 万春和;黄瑜;陈翠腾;傅光华;程龙飞;施少华;陈红梅;傅秋玲;刘荣昌 | 申请（专利权）人： | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 饶文君;蔡学俊 |
| 地址： | 350011 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 鉴别 dhav 疫苗 诊断 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于鉴别DHAV-1野毒和疫苗弱毒的鉴别诊断引物，其特征在于：所述引物为：DHAV-1wv-F1：5’-CCTTGAATGTTGGAATCCTATA-3’，
DHAV-1wv-R1：5’-CTTCATCCTCATTACTCACATT-3’。
2.一种用于鉴别DHAV-1野毒和疫苗弱毒的鉴别诊断试剂盒，其特征在于：包含权利要求1所述引物。
3.一种用于鉴别DHAV-1野毒和疫苗弱毒的鉴别诊断方法，其特征在于：所述方法包括如下：
（1）从检查样品中提取病毒的基因组DNA；
（2）采用权利要求1所述的鉴别诊断引物，同时对DHAV-1野毒和疫苗弱毒进行PCR扩增，得到相应的扩增产物；
（3）将PCR产物利用Xho Ⅰ酶进行酶切鉴定，酶切体系为30μL体系：其中10×QuickCutGreen Buffer 3μL、QuickCut™ Xho Ⅰ酶3μL、PCR产物20μL，补充灭菌去离子水至终体积30μL；经酶切鉴定，DHAV-1疫苗毒产物有两条，大小分别为179bp和363bp；DHAV-1强毒产物大小不变，仍然是542bp。
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