[发明专利]一种人精子清洗液及其制备方法在审

专利信息
申请号: 202011272707.X 申请日: 2020-11-13
公开(公告)号: CN112481197A 公开(公告)日: 2021-03-12
发明(设计)人: 林小贞 申请(专利权)人: 深圳韦拓生物科技有限公司
主分类号: C12N5/076 分类号: C12N5/076
代理公司: 深圳市德锦知识产权代理有限公司 44352 代理人: 黄萍
地址: 518000 广东省深圳市坪山新区坪*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 人精 清洗 及其 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种人精子清洗液,包括含缓冲成分的无机盐溶液,其特征在于,在所述无机盐溶液中添加了生物素和硫辛酸。

2.如权利要求1所述的人精子清洗液,其特征在于,所述生物素的含量为8-20nM/L,硫辛酸的含量为0.01-0.05mM/L。

3.如权利要求2所述的人精子清洗液,其特征在于,所述含缓冲成分的无机盐溶液配方为氯化钠100~120mM/L、氯化钾4.10~5.28mM/L、磷酸二氢钾0.25~0.45mM/L二水氯化钙1.70~2.38mM/L、七水硫酸镁0.10~0.30mM/L、碳酸氢钠1~7mM/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸12-15.5mM/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸钠5-9mM/L、丙酮酸钠0.10~0.56mM/L、乳酸钠5~16.4mM/L、葡萄糖0.5~5.06mM/L、丙胺酰谷氨酰胺0~1.0mM/L、乙二胺四乙酸二钠0~0.02mM/L、牛磺酸0.01~0.19mM/L、硫酸庆大霉素0.01~0.02g/L、人血清蛋白5~10g/L。

4.如权利要求3所述的人精子清洗液,其特征在于,所述人精子清洗液的配方为:氯化钠110mM/L、氯化钾4.69mM/L、磷酸二氢钾0.35mM/L、二水氯化钙2.04mM/L、七水硫酸镁0.2mM/L、碳酸氢钠4mM/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸12mM/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸钠9mM/L、丙酮酸钠0.33mM/L、乳酸钠10.7mM/L、葡萄糖2.78mM/L、丙胺酰谷氨酰胺0.5mM/L、乙二胺四乙酸二钠0.01mM/L、牛磺酸0.10mM/L、硫酸庆大霉素0.01g/L、人血清蛋白5g/L、生物素10nM/L、硫辛酸0.04mM/L。

5.如权利要求3所述的人精子清洗液,其特征在于,所述人精子清洗液的配方为:氯化钠105mM/L、氯化钾4.4mM/L、磷酸二氢钾0.3mM/L、二水氯化钙1.87mM/L、七水硫酸镁0.15mM/L、碳酸氢钠2.5mM/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸15.5mM/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸钠6.5mM/L、丙酮酸钠0.22mM/L、乳酸钠7.85mM/L、葡萄糖1.64mM/L、丙胺酰谷氨酰胺0.25mM/L、乙二胺四乙酸二钠0.01mM/L、牛磺酸0.06mM/L、硫酸庆大霉素0.01g/L、人血清蛋白5g/L、生物素9nM/L、硫辛酸0.03mM/L。

6.如权利要求3所述的人精子清洗液,其特征在于,所述人精子清洗液的配方为:氯化钠115mM/L、氯化钾4.99mM/L、磷酸二氢钾0.4mM/L、二水氯化钙2.21mM/L、七水硫酸镁0.25mM/L、碳酸氢钠5.5mM/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸13.5mM/L、4-羟乙基哌嗪乙磺酸钠7mM/L、丙酮酸钠0.45mM/L、乳酸钠13.55mM/L、葡萄糖3.92mM/L、丙胺酰谷氨酰胺0.75mM/L、乙二胺四乙酸二钠0.01mM/L、牛磺酸0.15mM/L、硫酸庆大霉素0.01g/L、人血清蛋白8.75g/L、生物素15nM/L、硫辛酸0.04mM/L。

7.如权利要求1所述的人精子清洗液在人类精子体外制备过程中的应用。

8.一种制备如权利要求1所述人精子清洗液的方法,包括以下步骤:

a、按配方称量所有固体成分并分开放置,其中生物素及硫辛酸按100倍称量;

b、将除生物素、硫辛酸、硫酸庆大霉素和人血清白蛋白外的所有成分加入并溶解于超纯水中,配成缓冲盐溶液;

c、将生物素及硫辛酸溶解于适量水中配制成100×浓储液;

d、向步骤b获得的缓冲盐溶液中加入硫酸庆大霉素、百分之一生物素及硫辛酸,溶解后得基础液;

e、测量并调节上述基础液pH值在7.4±0.1,渗透压在280~290mOsm/kg;

f、将基础液经0.22μm过滤器过滤,按比例加入人血清白蛋白并分装、封口,2-8℃保存。

9.如权利要求8所述的方法获得的人精子清洗液。

10.如权利要求8所述的方法获得的人精子清洗液在人类精子体外制备过程中的应用。

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