[发明专利]一种人精子清洗液及其制备方法

说明书

本发明公开了一种人精子清洗液，包括含缓冲成分的无机盐溶液，其特征在于，在所述无机盐溶液中添加了生物素和硫辛酸。

技术领域

本发明属于人类辅助生殖领域，具体涉及一种人精子清洗液以及制备所述人精子清洗液的方法。

背景技术

精液优化处理作为辅助生殖技术(ART)一个非常重要的环节，不仅可以去除精浆、不活动精子、畸形精子、细胞碎片及其它有害的物质，而且还可以制备出含高比例的形态学正常的活动精子。理想的预处理后精子是在加入少量的培养液后去除精浆、白细胞和细菌并富集正常形态和活力的精子。目前，临床上常用的精子优选方法主要包括上游法、密度梯度离心法等。

精子含有大量的多不饱和脂肪酸，而精子细胞由于细胞质明显缺乏而缺乏防御系统，因此它不能有效地修复膜损伤，使精子特别容易受到氧化应激的影响，任何体外的操作都有可能导致活性氧水平升高，从而对精子存活造成影响。

目前使用的精子准备液或洗精液为基础盐缓冲溶液，在精子体外操作过程中难于避免操作过程中带来的损伤和活性氧的水平的升高。在常规的上游法中，功能精子通过离心法与缺陷精子或白细胞进行细胞间的紧密接触，由于精子的浆膜中含有大量的多不饱和脂肪酸，这些活性氧会导致脂质过氧化，从而导致精子功能(包括运动性)的急剧下降，引起活性氧对精子质膜的大量氧化损伤，从而对精子功能造成损害(Aitken RJ,etal.Significance of reactive oxygen species and antioxidants in defining theefficacy of sperm preparation techniques.J Androl)(Mortimer D.Spermpreparation techniques and iatrogenic failures of in-vitro fertilization.HumReprod)。

生物素(维生素B7或维生素H)是人体正常生长发育所必需的一种微量营养素，参于在脂肪酸的生物合成、糖异生、支链氨基酸代谢和嘌呤核苷酸的合成等羧化反应。研究表明，生物素在繁殖和发育中发挥作用，妊娠期生物素的缺乏可导致小鼠和仓鼠的致畸(MockDM.Marginal biotin deficiency is common in normal human pregnancy and ishighly teratogenic in mice.J Nutr Watanabe T.Dietary biotin deficiencyaffects reproductive function and prenatal development in hamsters.J Nutr)。

硫辛酸(AApAa-AApAAc acAdA ALA)是一种有效的生物抗氧化剂之一，由于具有水和脂肪的溶解度，被认为是一种通用的抗氧化剂。这种抗氧化剂可以很容易地穿透不同的组织、细胞，甚至像线粒体这种活性氧主要产生的细胞器。硫辛酸是一种由辛酸衍生而来的有机硫化合物(二硫醇)，对许多酶起着必要的辅助作用。

发明人尝试将上述两种成分用于洗精液，希望能减少精子体外处理过程中的损伤作用，促进体外精子活力，减少活性氧水平，以提高辅助生殖中精子制备效率和质量。

发明内容

本发明的目的是提供一种人类精子清洗液。生物素，如维生素B7或维生素H是人体正常生长发育所必需的一种微量营养素，参于在脂肪酸的生物合成、糖异生、支链氨基酸代谢和嘌呤核苷酸的合成等羧化反应；硫辛酸(ALA)是一种有效的生物抗氧化剂之一，由于具有水和脂肪的溶解度，是一种通用的抗氧化剂，这种抗氧化剂可以很容易地穿透不同的组织、细胞，甚至像线粒体这种活性氧主要产生的细胞器，硫辛酸是一种由辛酸衍生而来的有机硫化合物(二硫醇)，对许多酶起着必要的辅助作用。本发明以含缓冲成分无机盐溶液，添加了生物素和硫辛酸，获得了一种性能优越的人精子清洗液。

本发明的具体技术方案为：