[发明专利]肺癌诊断的特征物及其筛选方法和应用

说明书

本发明提供了肺癌诊断特征物及其筛选方法和应用，属于生物科学技术领域；所述肺癌诊断特征物包括呼出气体中的挥发性有机物和含氧挥发性有机物。通过对待检测患者的呼出气体中的肺癌诊断特征物进行检测，能够准确诊断患者患肺癌的情况，实现肺癌的早期诊断。本发明的肺癌诊断特征物能够简单、高灵敏度并且无损的用于肺癌患者诊断。

技术领域

本发明涉及生物科学技术领域，尤其涉及肺癌诊断的特征物及其筛选方法和应用。

背景技术

肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。临床发现原位肺癌的治愈率高达100％，I期肺癌的5年生存率约70％，晚期患者的5年生存率仅有5％～20％。肺癌早期诊断可以及早的发现病危人群，配合及时的治疗不仅可以减少病人痛苦，也可以有效减少肺癌死亡率。传统的筛查方法中为CT扫描、X射线、MRI、计算机断层扫描、肺活检、放射性核素肺扫描、染色体异常及基因突变检查等。然而，单纯的形态学标准尚无足够信心将早期肺癌与良性结节区分开来，因此手术切除的假阳性病例经常发生，加上这些筛查方式操作复杂、检出率低或对人体有损伤，不适于高效方便的普查。由于目前缺乏适用于大规模普查肺癌的早期诊断方法，而肿瘤前期不易察觉，患者早期表现的诸如咳痰、气闷等征兆极易误诊和忽视，患者大多确诊时已经错过最佳治疗时间，导致肺癌死亡率较高。

发明内容

本发明的目的在于提供肺癌诊断的特征物及其筛选方法和应用，利用本发明的特征物能够实现肺癌患者的高效无损诊断。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了肺癌诊断特征物，包括呼出气体中的挥发性有机物和含氧挥发性有机物。

优选的，所述挥发性有机物包括甲基丙烯酸甲酯、四氢呋喃、2-己酮、四氯乙烯、1-戊烯、丁二烯、正己烷、1,2,3-三甲基苯、异丙苯、氯代甲苯、1,1,1-三氯乙烷、1,2,4-三甲基苯、对-二乙基苯、丙烯、3-甲基庚烷、邻二氯苯、乙酸乙烯酯、顺-1,3-二氯-1-丙烯和乙烯中的一种或几种；所述含氧挥发性有机物包括甲醛、2-丁酮、环己酮和乙醛中的一种或几种。

本发明还提供了检测上述方案所述肺癌诊断特征物的试剂在制备肺癌诊断试剂盒中的应用。

本发明还提供了本发明还提供了一种筛选上述方案所述肺癌诊断特征物的方法，包括以下步骤：

1)分别采集肺癌患者和健康人的第一呼出气体，分别采用热解析气相色谱和质谱联用的方法分析所述第一呼出气体中挥发性有机物的种类及含量，得到患病挥发性有机物文库和健康挥发性有机物文库；

2)分别采集肺癌患者和健康人的第二呼出气体，分别采用2,4-二硝基苯肼衍生小柱对所述第二呼出气体进行富集、洗脱，得到富集样品，分别采用超高液相色谱和质谱联用的方法分析所述富集样品中含氧挥发性有机物的种类及含量，得到患病含氧挥发性有机物文库和健康含氧挥发性有机物文库；

3)采用主成分能分析和正交偏最小二乘法模型分别分析患病挥发性有机物文库和健康挥发性有机物文库中的差异性，通过变量投影重要性值筛选对患病文库和健康文库之间挥发性有机物差异贡献较大的挥发性有机物，其中变量投影重要性值1.0的物质为肺癌诊断挥发性有机物特征物；变量投影重要性值1.0的含氧挥发性有机物为肺癌诊断含氧挥发性有机物特征物；

所述步骤1)和步骤2)之间没有时间顺序限制。

优选的，步骤1)中所述采集肺癌患者和健康人的第一呼出气体的装置包括以下组件：吹嘴、Nafion管和苏玛罐；所述吹嘴通过Nafion管和苏玛罐连接。

优选的，步骤2)中采集肺癌患者和健康人的第二呼出气体的装置包括连接有吹嘴的Tedlar采样袋。