[发明专利]一种脱细胞真皮基质材料及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种脱细胞真皮基质材料的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)取动物皮肤组织材料，清除表面脂肪及表皮，并用超声波清洗机洗净，得到预处理后的真皮原料；

(2)在超声波清洗机中在频率为25～40kHz下将步骤(1)得到的预处理后的真皮原料用碱溶液浸泡处理，然后用纯化水洗净，得到病毒灭活处理的真皮材料；所述碱溶液为KOH溶液和/或NaOH溶液，所述碱溶液的浓度为0.5mol/L，所述碱溶液的体积用量为所述预处理后的真皮原料体积的5～20倍；用碱溶液浸泡处理的时间为45～120min；

(3)在超声波清洗机中在频率为25～40kHz下用盐酸溶液对步骤(2)得到的病毒灭活处理的真皮材料进行脱细胞处理；所述盐酸溶液的浓度为0.5mol/L，所述盐酸溶液的体积用量为所述预处理后的真皮原料体积的5～20倍；用盐酸溶液进行脱细胞处理的时间为45～120min；

(4)更换所述盐酸溶液后重复步骤(3)2～4次，得到脱细胞处理材料；

(5)在超声波清洗机中依次用磷酸盐缓冲溶液和纯化水对步骤(4)得到的脱细胞处理材料进行清洗，得到脱细胞真皮组织；

(6)将步骤(5)得到的脱细胞真皮组织进行冷冻干燥；

(7)对步骤(6)中冷冻干燥后的脱细胞真皮组织依次进行裁剪和包装，然后采用环氧乙烷灭菌，制得脱细胞真皮基质材料；所述环氧乙烷的浓度为600～700mg/L，采用环氧乙烷灭菌的灭菌温度为30～42℃，灭菌湿度为35～65％RH，灭菌时间为1～4h；

在步骤(6)中，所述冷冻干燥包括如下子步骤：

(a)将步骤(5)得到的脱细胞真皮组织在温度为-30℃下进行预冷冻2h；

(b)将进行预冷冻后的脱细胞真皮组织在温度为-10℃的真空条件下处理10h，然后置于温度为0℃的真空条件下处理10h，以完成脱细胞真皮组织的第一阶段升华过程；

(c)将完成了第一阶段升华过程的脱细胞真皮组织在温度为5℃的真空条件下处理4h，然后置于温度为15℃的真空条件下处理2h，再置于温度为25℃的真空条件下处理2h，最后置于温度为35℃的真空条件下处理2h，以完成脱细胞真皮组织的第二阶段升华过程，由此完成脱细胞真皮组织的冷冻干燥。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

在步骤(1)中，所述动物皮肤组织材料选自猪、牛或羊的皮肤组织。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

在步骤(5)中，所述磷酸盐缓冲溶液的pH值为7.0～7.4，用于配制所述磷酸盐缓冲溶液的试剂为NaCl、KCl、KH₂PO₄和Na₂HPO₄，所述磷酸盐缓冲溶液的体积用量为所述预处理后的真皮原料体积的10～30倍；和/或

在步骤(5)中，用磷酸盐缓冲溶液进行清洗的时间为30～120min。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

在步骤(7)中，采用无菌特卫强包装袋进行包装。

5.由权利要求1至4中任一项所述的制备方法制得的脱细胞真皮基质材料。

6.由权利要求1至4中任一项所述的制备方法制得的脱细胞真皮基质材料在制备牙种植或辅助骨再生或引导组织生长的产品中的应用。