[发明专利]液体型凝血酶原时间测定试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.液体型凝血酶原时间测定试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括凝血活酶、稳定剂、表面活性剂、盐离子和缓冲液，其中，

所述凝血活酶选自重组人组织因子、兔脑粉、卵磷脂中的至少两个组分；

所述稳定剂占缓冲液的0.01～8wt％；

所述表面活性剂占缓冲液的0.01～10wt％；

所述盐离子的浓度为10～200mM；

所述缓冲液的pH为6.0～8.0，所述缓冲液的浓度为10～150mM；

所述稳定剂包括A组分和B组分，A组分：B组分的重量比为1:0.5～800，其中，A组分包括叠氮钠、ProClin300、山梨酸钾、苯甲酸、苯甲酸钠、庆大霉素硫酸盐、乳酸钠中的一种或几种，B组分包括牛血清白蛋白、甘氨酸、海藻糖、甘露醇或蔗糖的一种或几种；

所述表面活性剂为聚乙二醇6000、吐温20、吐温80、曲拉通100、聚氧乙烯月桂醚、硬脂酸钠中的一种或几种；

兔脑粉占缓冲液的1～10wt％，组织因子占缓冲液的0.01～1wt％，卵磷脂占缓冲液的0.1～15wt％；

所述盐离子包括氯化钙，还包括氯化钠、氯化钾、氯化镁、硫酸钠、硫酸镁、硫酸钾的一种或几种；

所述缓冲液为3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸钠缓冲液、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液、磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液、氨丁三醇盐酸缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液、哌嗪-1,4-二乙磺酸缓冲液中的一种或几种。

2.权利要求1所述的液体型凝血酶原时间测定试剂盒的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

(1)配制浓度为10～150mM缓冲液，并将缓冲液的pH调至6.0～8.0；

(2)向缓冲液中分别加入盐离子、稳定剂、表面活性剂，盐离子的浓度为10～200mM，表面活性剂占缓冲液重量的0.01～10wt％，稳定剂占缓冲液的0.01～8wt％；

(3)加入凝血活酶，溶解，即得，其中，所述凝血活酶选自重组人组织因子、兔脑粉、卵磷脂中的至少两个组分。

3.根据权利要求2所述的液体型凝血酶原时间测定试剂盒的制备方法，其特征在于，所述稳定剂包括A组分和B组分，A组分：B组分的重量比为1:0.5～800，其中，A组分包括叠氮钠、ProClin300、山梨酸钾、苯甲酸、苯甲酸钠、庆大霉素硫酸盐、乳酸钠中的一种或几种，B组分包括牛血清白蛋白、甘氨酸、海藻糖、甘露醇或蔗糖的一种或几种。

4.根据权利要求2所述的液体型凝血酶原时间测定试剂盒的制备方法，其特征在于，所述盐离子包括氯化钙，还包括氯化钠、氯化钾、氯化镁、硫酸钠、硫酸镁、硫酸钾的一种或几种。

5.根据权利要求2所述的液体型凝血酶原时间测定试剂盒的制备方法，其特征在于，所述缓冲液为3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸钠缓冲液、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液、磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液、氨丁三醇盐酸缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液、哌嗪-1,4-二乙磺酸缓冲液中的一种或几种。

6.根据权利要求2所述的液体型凝血酶原时间测定试剂盒的制备方法，其特征在于，兔脑粉占缓冲液的1～10wt％，组织因子占缓冲液的0.01～1wt％，卵磷脂占缓冲液的0.1～15wt％。