[发明专利]泡盛曲霉及其在制备单宁酶和降解单宁中的应用有效
申请号: | 202011283991.0 | 申请日: | 2020-11-17 |
公开(公告)号: | CN112646728B | 公开(公告)日: | 2022-06-07 |
发明(设计)人: | 黄和;王文慧;屈艳君;曹家南;齐雅雯;韦智匀;宋萍;徐晴 | 申请(专利权)人: | 南京师范大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N9/18;C12R1/66 |
代理公司: | 北京润平知识产权代理有限公司 11283 | 代理人: | 黄志兴 |
地址: | 210046 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 曲霉 及其 制备 单宁 降解 中的 应用 | ||
1.一种泡盛曲霉,其特征在于,所述泡盛曲霉(Aspergillus awamori)的保藏编号为GDMCC No.61266。
2.一种菌剂,其特征在于,该菌剂含有权利要求1所述的泡盛曲霉。
3.根据权利要求2所述的菌剂,其特征在于,所述菌剂含有所述泡盛曲霉的活菌体、死菌体和发酵产物中的至少一种。
4.权利要求1所述的泡盛曲霉、权利要求2或3所述的菌剂在制备单宁酶和/或降解单宁中的应用。
5.一种降解单宁的方法,其特征在于,该方法包括:将权利要求1所述的泡盛曲霉和/或权利要求2或3所述的菌剂与含有单宁的样品接触。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述含有单宁的样品通过将含有单宁的植物原料经提取处理得到;
优选地,所述提取处理包括以下步骤:
(1)将所述含有单宁的植物原料与提取溶剂混合后进行振荡、超声处理,经固液分离I得到提取液;
(2)将所述提取液除去所述提取溶剂得到所述含有单宁的样品。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述提取溶剂为乙醇-水溶液,所述提取溶剂与所述含有单宁的植物原料的质量比为25-40:1;
所述振荡至少满足以下条件:振荡温度为50-70℃、振荡速度为150-200rpm、振荡时间为0.5-2h;
所述超声至少满足以下条件:超声温度为50-70℃、超声功率为400-580W、超声时间为0.5-2h;
所述固液分离I采用离心分离,所述固液分离I至少满足以下条件:离心温度为20-30℃、离心转速为7000-10000rpm、离心时间为3-8min。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,该方法包括:将所述菌剂与所述含有单宁的样品接触,所述菌剂为所述泡盛曲霉的发酵产物;其中,所述泡盛曲霉的发酵产物的制备方法包括以下步骤:将所述泡盛曲霉进行种子培养、发酵培养后,经固液分离II得到发酵菌体,将所述发酵菌体经细胞破碎后进行固液分离III得到清液。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述细胞破碎的过程包括:将所述发酵菌体利用缓冲液清洗后,再与所述缓冲液混合后进行超声破碎;
优选地,所述缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,所述超声破碎至少满足以下条件:所述发酵菌体与所述缓冲液的质量比为1:1-3、温度为2-10℃、超声功率为400-650W、超声时间为10-30min;
所述固液分离II采用过滤分离;
所述固液分离III采用离心分离,所述固液分离III至少满足以下条件:离心温度为0-10℃、离心转速为7000-10000rpm、离心时间为15-30min。
10.根据权利要求8或9所述的方法,其特征在于,所述发酵菌体与所述含有单宁的样品中单宁的质量比为40-180:1,所述接触至少满足以下条件:温度为35-50℃、转速为150-200rpm、时间为40-60h。
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