[发明专利]泡盛曲霉及其在制备单宁酶和降解单宁中的应用有效
申请号: | 202011283991.0 | 申请日: | 2020-11-17 |
公开(公告)号: | CN112646728B | 公开(公告)日: | 2022-06-07 |
发明(设计)人: | 黄和;王文慧;屈艳君;曹家南;齐雅雯;韦智匀;宋萍;徐晴 | 申请(专利权)人: | 南京师范大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N9/18;C12R1/66 |
代理公司: | 北京润平知识产权代理有限公司 11283 | 代理人: | 黄志兴 |
地址: | 210046 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 曲霉 及其 制备 单宁 降解 中的 应用 | ||
本发明涉及单宁降解技术,公开了一种泡盛曲霉及其在制备单宁酶和降解单宁中的应用。具体地,本发明提供一种泡盛曲霉,所述泡盛曲霉的保藏编号为GDMCC No.61266。本发明还提供一种菌剂,该菌剂含有上述的泡盛曲霉。本发明还提供一种降解单宁的方法,该方法包括:将上述泡盛曲霉和/或上述菌剂与含有单宁的样品接触。本发明提供的泡盛曲霉能够高效生产单宁酶,且酶解反应的条件具有广泛的pH适应性,从而能够在短时间内高效催化单宁的降解,不易造成物质变性。
技术领域
本发明涉及单宁降解技术,具体地,涉及一种泡盛曲霉及其在制备单宁酶和降解单宁中的应用。
背景技术
单宁是广泛存在于植物中的一种多酚类化合物,在植物酚类物质中,其含量仅次于木质素,多出现于营养价值极高的饲用树木、灌木、豆科植物和谷物中。单宁能破坏并阻碍营养物质的消化利用,为典型抗营养因子,目前其利用一般以小分子形式如鞣花酸、儿茶素、花青素及其衍生物为主,因此通过降解单宁,获得低分子量单宁是提高单宁利用率和单宁精细化利用的重要途径。
大分子单宁的降解主要有化学降解和生物降解。化学降解为利用强酸或强碱等氧化剂在高温环境下氧化降解或高度亚硫酸化,其降解效率高,但易造成环境污染,且对设备的耐腐蚀要求较高,因此不易应用于工业化。生物降解法主要利用关键限制酶单宁酶实现对单宁的降解,其可作用于水解单宁、复杂单宁以及没食子酸与醇形成的酯,降解具有专一性,生产过程绿色无污染,但是目前生物降解采用的商品酶的酶活性为200U/g左右,售价较高,限制了其在工业中的应用。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有的单宁降解过程中存在的上述问题,提供一种泡盛曲霉及其在制备单宁酶和降解单宁中的应用。
为了实现上述目的,本发明第一方面提供一种泡盛曲霉,所述泡盛曲霉(Aspergillus awamori)于2020年11月4日送交广东省微生物菌种保藏中心(简称GDMCC,地址:中国广州市先烈中路100号省微生物所实验楼五楼)进行保藏,保藏编号为GDMCCNo.61266。
本发明第二方面提供一种菌剂,该菌剂含有上述的泡盛曲霉。
优选地,所述菌剂含有所述泡盛曲霉的活菌体、死菌体和发酵产物中的至少一种。
本发明第三方面提供上述泡盛曲霉、上述菌剂在制备单宁酶和/或降解单宁中的应用。
本发明第四方面提供一种降解单宁的方法,该方法包括:将上述的泡盛曲霉和/或上述的菌剂与含有单宁的样品接触。
优选地,所述含有单宁的样品通过将含有单宁的植物原料经提取处理得到;
优选地,所述提取处理包括以下步骤:
(1)将所述含有单宁的植物原料与提取溶剂混合后进行振荡、超声处理,经固液分离I得到提取液;
(2)将所述提取液除去所述提取溶剂得到所述含有单宁的样品。
优选地,所述提取溶剂为乙醇-水溶液,所述提取溶剂与所述含有单宁的植物原料的质量比为25-40:1;所述振荡至少满足以下条件:振荡温度为50-70℃、振荡速度为150-200rpm、振荡时间为0.5-2h;所述超声至少满足以下条件:超声温度为50-70℃、超声功率为400-580W、超声时间为 0.5-2h;所述固液分离I采用离心分离,所述固液分离I至少满足以下条件:离心温度为20-30℃、离心转速为7000-10000rpm、离心时间为3-8min。
优选地,该方法包括:将所述菌剂与所述含有单宁的样品接触,所述菌剂为所述泡盛曲霉的发酵产物;其中,所述泡盛曲霉的发酵产物的制备方法包括以下步骤:将所述泡盛曲霉进行种子培养、发酵培养后,经固液分离II得到发酵菌体,将所述发酵菌体经细胞破碎后进行固液分离III得到清液。
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