[发明专利]引物探针组合、脑炎病毒检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种引物探针组合，其特征在于，包括乙型脑炎病毒引物探针组和圣路易斯脑炎病毒引物探针组，所述乙型脑炎病毒引物探针组包括乙型脑炎病毒特异性引物、第一类Y引物和第一类荧光探针，所述第一类Y引物包括第一类第一Y引物、第一类第二Y引物中的至少一种；所述圣路易斯脑炎病毒引物探针组包括圣路易斯脑炎病毒特异性引物、第二类Y引物和第二类荧光探针，所述第二类Y引物包括第二类第一Y引物、第二类第二Y引物中的至少一种；

其中，所述乙型脑炎病毒特异性引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:1-2所示的核苷酸序列，或由所述SEQ ID NO:1-2所示的核苷酸序列经缺失、插入或替换所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述第一类第一Y引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列，或由所述SEQID NO:3所示的核苷酸序列经缺失、插入或替换所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述第一类第二Y引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列，或由所述SEQID NO:4所示的核苷酸序列经缺失、插入或替换所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述第一类荧光探针的核苷酸序列为SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列，或由所述SEQID NO:5所示的核苷酸序列经缺失、插入或替换所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述圣路易斯脑炎病毒特异性引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:6-7所示的核苷酸序列，或由所述SEQ ID NO:6-7所示的核苷酸序列经缺失、插入或替换所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述第二类第一Y引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列，或由所述SEQID NO:8所示的核苷酸序列经缺失、插入或替换所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述第二类第二Y引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:9所示的核苷酸序列，或由所述SEQID NO:9所示的核苷酸序列经缺失、插入或替换所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述第二类荧光探针的核苷酸序列为SEQ ID NO:10所示的核苷酸序列，或由所述SEQID NO:10所示的核苷酸序列经缺失、插入或替换所得具有相同功能的核苷酸序列；

所述第一类荧光探针上的荧光基团与所述第二类荧光探针上的荧光基团不同。

2.根据权利要求1所述的引物探针组合，其特征在于，所述第一类探针的5’端设有荧光基团FAM，3’端设有淬灭基团BHQ1。

3.根据权利要求1所述的引物探针组合，其特征在于，所述第二类探针的5’端设有荧光基团HEX，3’端设有淬灭基团BHQ2。

4.一种脑炎病毒检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1-3任一项所述的引物探针组合。

5.根据权利要求4所述的脑炎病毒检测试剂盒，其特征在于，所述引物探针组合中，所述乙型脑炎病毒特异性引物的终浓度为0.25μM-0.50μM，所述第一类Y引物的终浓度为0.25μM-0.50μM，所述第一类探针的终浓度为0.10μM-0.30μM；和/或

所述圣路易斯脑炎病毒特异性引物的终浓度为0.25μM-0.50μM，所述第二类Y引物的终浓度为0.25μM-0.50μM，所述第二类探针的终浓度为0.10μM-0.30μM。

6.根据权利要求4所述的脑炎病毒检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括反应缓冲液、酶混合液、质控品中的至少一种。

7.根据权利要求6所述的脑炎病毒检测试剂盒，其特征在于，所述反应缓冲液包括一步定量RT-qPCR缓冲液；和/或

所述质控品包括阳性质控品和阴性质控品。

8.权利要求4-7任一项所述脑炎病毒检测试剂盒在检测乙型脑炎病毒和/或圣路易斯脑炎病毒中的应用。