[发明专利]一种调节肠道菌群的植物乳杆菌LP45活菌制剂及应用

说明书

本发明提供一种植物乳杆菌活菌制剂及其用途，属于生物技术领域，包括植物乳杆菌冻干菌粉及冻干植物乳杆菌微胶囊，其中，制备过程中所用冷冻干燥保护剂包括甘油1‑3wt%、10‑羟基‑2‑癸烯酸0.05‑0.15wt%，10‑羟基‑2‑癸烯酸与甘油质量比为1:15‑20。本发明提供的一种植物乳杆菌活菌制剂具有生物活性高，能够增强机体免疫功能、高效且持久调整肠道菌群平衡的优点。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种调节肠道菌群的植物乳杆菌LP45活菌制剂及应用。

背景技术

植物乳杆菌(L plantarum)属于乳杆菌科中的乳杆菌属，革兰氏阳性菌，兼性厌氧，是人体胃肠道的益生菌群，代谢可以产生有机、细菌素、过氧化氢、双乙酰等多种天然抑菌物质，调整菌群之间的关系，维持和保证菌群最佳优势组合以及组合的稳定，阻止了致病菌的定殖与入侵，拮抗致病菌和有害微生物的生长及毒素的黏附，具有维持肠道菌群平衡的作用。但是乳酸菌较难长期保存，因此，乳酸菌的保藏成了热门的研究课题。利用真空冷冻干燥技术生产活菌制剂是多种保藏方法中较为理想的一种。而制作菌粉的关键是保护剂种类及配比的选择。因此，选择一种使用便捷的保藏形式，以及研究使菌种存活率高的保护剂配方有着积极意义。

乳酸菌的长期保藏方法，多采用冷冻干燥法或喷雾干燥法，将乳酸菌制成粉剂，用以延长保存时间。冷冻干燥是将欲保藏的微生物细胞悬浮液冻结后，在真空条件下使冰升华，最后达到干燥的目的。此方法主要是根据微生物生理、生化特点，干燥后使微生物的代谢处于不活泼、生长繁殖受到抑制，达到休眠状态，以保持菌株原有特性。而且用这种方法生产的发酵剂与喷雾干燥法等其他方法生产的发酵剂相比具有更高的稳定性、活性。但真空冷冻干燥过程是使发酵液中的游离水在冻结状态下失去的一个过程，冷冻和干燥两个过程会造成部分微生物细胞的损伤、死亡及某些酶蛋白分子的钝化，如果冻干工艺中保护剂选择不当，就会使乳酸菌的存活率下降。发酵液干燥前后乳酸菌的存活率大小可直接体现不同保护剂对乳酸菌活力的影响。因此，冻干保护剂是制作干燥发酵剂最为关键的因素之一，它不仅影响发酵剂在冻干过程中的细胞存活率，也影响保藏期间的细胞稳定性。

现有技术如公开号为CN 103695330 A的中国发明专利，公开了一种植物乳杆菌活菌制剂的制备方法，是将植物乳杆菌培养至稳定期后加入经过破壁处理的酿酒酵母，将发酵液离心得到菌泥，菌泥中混入保护剂进行真空干燥，将真空干燥得到的植物乳杆菌菌粉与低聚糖混合。本发明的方法简便、成本低，实现了废物资源化，适合工业化生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种生物活性高，能够增强机体免疫功能、高效且持久调整肠道菌群平衡的一种调节肠道菌群的植物乳杆菌LP45活菌制剂及应用。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

提供一种植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法，具体包括以下步骤：

a、将植物乳杆菌LP45发酵培养后离心收集菌体；

b、用冷冻干燥保护剂与菌体混合均匀，得到菌悬液；

c、将菌悬液倒入冻干瓶，瓶口密封，在-40至-80℃预冻10-14h，再置于真空冷冻干燥机中-40至-50℃条件下干燥14-20h，得到所述植物乳杆菌冻干菌粉；

上述冷冻干燥保护剂包括甘油1-3wt%、10-羟基-2-癸烯酸0.05-0.15wt%，10-羟基-2-癸烯酸与甘油质量比为1:15-20。10-羟基-2-癸烯酸与甘油质量比为1:15-20时，可能通过增强甘油对水的结晶过程的弱化，更好的保护细胞免受损伤，能够有效提高菌体在冻干过程中的活菌存活率，有利于植物乳杆菌在胃肠道中定植，提高对人体的保健作用。

优选地，上述冷冻干燥保护剂中还包括脱脂乳粉10-15wt%、海藻糖5-10wt%、蔗糖3-8wt%、明胶1-3wt%、谷氨酸钠0.05-2wt%、L-半胱氨酸0.05-1wt%和硫酸锰0.3-0.5wt%。