[发明专利]一种靶向HER2的CAR-T表达载体及其构建和应用

权利要求书

1.一种靶向HER2的CAR-T表达载体，其特征在于，

所述CAR-T表达载体包含靶向HER2的嵌合抗原受体基因序列；

所述靶向HER2的嵌合抗原受体包括依次连接的：CD8α信号肽、靶向HER2的单链抗体、CD8α铰链区、CD8α跨膜区、共刺激因子4-1BB、CD3ζ胞内信号肽、P2A连接肽、PD1信号肽、PD1胞外域、CD28跨膜域以及CD28胞质信号域。

2.根据权利要求1所述的一种靶向HER2的CAR-T表达载体，其特征在于，

CD8α信号肽核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

靶向HER2的单链抗体轻链VL核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；

靶向HER2的单链抗体铰链Linker核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；

靶向HER2的单链抗体重链VH核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；

CD8α铰链区核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；

CD8α跨膜区核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；

共刺激因子4-1BB核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；

CD3ζ胞内信号肽核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；

P2A连接肽核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；

PD1信号肽核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示；

PD1胞外域核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；

CD28跨膜域核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示；

CD28胞质信号域核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示。

3.权利要求1或2所述的一种靶向HER2的CAR-T表达载体的构建方法，其特征在于，以靶向HER2的嵌合抗原受体基因为目的基因，利用重组慢病毒包装系统，构建获得靶向HER2的CAR-T表达载体。

4.一种CAR-T细胞，其特征在于，

所述CAR-T细胞为使用权利要求1或2所述的CAR-T表达载体转导T淋巴细胞获得。

5.权利要求1或2所述的CAR-T表达载体或权利要求4所述CAR-T细胞在制备抗肿瘤药物中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，

所述肿瘤为HER2过表达肿瘤。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，

所述肿瘤包括HER2阳性乳腺癌。