[发明专利]表皮细胞悬液的制备方法

权利要求书

1.一种表皮细胞悬液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

取健康皮肤的刃厚皮片；

将所述刃厚皮片放置在消化液中消化，所述消化液包括浓度为0.25%-0.75%的胰酶、浓度为0.05%的乙二胺四乙酸以及浓度为0-1000 ng/mL的人重组表皮细胞生长因子；

使用第一营养液清洗消化后的所述刃厚皮片后，将第二营养液滴加到清洗后的所述刃厚皮片上，刮取所述刃厚皮片的表皮，直至所述刃厚皮片的真皮层分离成若干块，得到混合细胞悬液，其中，第一营养液选自林格氏缓冲液、复方电解质缓冲液以及生理盐水中的至少一种，所述第二营养液为多肽纳米纤维水凝胶，所述多肽纳米纤维水凝胶中多肽的氨基酸序列为Ac-SLSLSLSLSLSL-KGEE-NH₂；

过滤所述混合细胞悬液以去除部分所述真皮层以及表皮残渣；以及

使用所述第二营养液配置过滤后的所述混合细胞悬液，从而得到所述表皮细胞悬液。

2.如权利要求1所述的表皮细胞悬液的制备方法，其特征在于，所述第二营养液的制备方法包括：

将多肽溶解于水中，静置后自组装形成所述多肽纳米纤维水凝胶；以及

稀释所述多肽纳米纤维水凝胶。

3.如权利要求1所述的表皮细胞悬液的制备方法，其特征在于，每平方厘米的所述刃厚皮片上所述消化液的用量为3-7 mL，所述消化的时间为15-45min。

4.如权利要求1所述的表皮细胞悬液的制备方法，其特征在于，所述刃厚皮片的厚度为200-500μm。

5.如权利要求1所述的表皮细胞悬液的制备方法，其特征在于，所述表皮细胞悬液包括表皮细胞、成纤维细胞、黑色素细胞以及朗格汉斯细胞。