[发明专利]表皮细胞悬液的制备方法

说明书

本发明提供了一种表皮细胞悬液的制备方法，包括以下步骤：取健康皮肤的刃厚皮片；将所述刃厚皮片放置在消化液中消化；使用第一营养液清洗消化后的所述刃厚皮片后，将第二营养液滴加到清洗后的所述刃厚皮片上，刮取所述刃厚皮片的表皮，直至所述刃厚皮片的真皮层分离成若干块，得到混合细胞悬液，其中，所述第二营养液包括多肽纳米纤维凝胶；过滤所述混合细胞悬液以去除部分所述真皮层以及表皮残渣；以及使用所述第二营养液配置过滤后的所述混合细胞悬液，从而得到所述表皮细胞悬液。本发明提供的所述制备方法能为细胞提供一定的类细胞外基质结构，促进细胞的粘附增殖。

技术领域

本发明涉及生物医学领域，尤其涉及一种表皮细胞悬液的制备方法。

背景技术

近年来，我国烧伤发病率占全国总人口约5％，白癜风的发病率也在1％-4％左右，烧伤治愈后的瘢痕及白癜风等表皮层疾病对患者外貌以及心理方面造成了很大的负面影响。目前利用有限的皮源对此类疾病的治疗主要有自体微粒皮、人工真皮复合自体皮以及Recell表皮治疗等方法。

其中，自体微粒皮是将自体健康皮肤分散成小颗粒后种植回患者创面上，该方法虽可以使皮片治疗面积扩大10-20倍，但是存在贴附率低以及有效率无法保证的问题；人工真皮复合自体皮是将人工真皮植入受损创面，待真皮层血管化之后植入自体刃厚表皮联合治疗，其虽对于烧伤治疗效果较好，但也无法大面积治疗受损皮肤创面；Recell表皮治疗是将自体刃厚表皮消化分离获得细胞悬液，直接喷涂于受损创面上，通过表皮细胞的迁移增殖分化来修复创面。

然而，由于Recell表皮治疗的喷涂介质仅仅是磷酸盐缓冲液，细胞在磷酸盐缓冲液中或者喷涂于创面上缺少一定的物理支撑，喷后易流动及团聚，愈后效果无法保证。

发明内容

有鉴于此，有必要提供一种能够提高表皮层治愈效果的表皮细胞悬液的制备方法，该制备方法能为细胞提供一定的类细胞外基质结构，促进细胞的粘附增殖。

本发明提供一种表皮细胞悬液的制备方法，包括以下步骤：

取健康皮肤的刃厚皮片；

将所述刃厚皮片放置在消化液中消化；

使用第一营养液清洗消化后的所述刃厚皮片后，将第二营养液滴加到清洗后的所述刃厚皮片上，刮取所述刃厚皮片的表皮，直至所述刃厚皮片的真皮层分离成若干块，得到混合细胞悬液，其中，所述第二营养液包括多肽纳米纤维凝胶；

过滤所述混合细胞悬液以去除部分所述真皮层以及表皮残渣；以及

使用所述第二营养液配置过滤后的所述混合细胞悬液，从而得到所述表皮细胞悬液。

本发明的制备方法能够有效提取表皮细胞，且所述第二营养液中的所述多肽纳米纤维凝胶具有分散型的纳米纤维结构，所述纳米纤维结构可支撑、促进细胞的粘附、迁移增殖和上皮化覆盖创面，从而有利于修复伤口。

附图说明

图1是本发明较佳实施例提供的表皮细胞悬液的制备流程图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。

请参阅图1，本发明较佳实施例提供一种表皮细胞悬液的制备方法，包括以下步骤：

步骤S11，取健康皮肤的刃厚皮片(即表层皮片)。