[发明专利]一种柱状黄杆菌减毒灭活疫苗制备方法在审
| 申请号： | 202011304215.4 | 申请日： | 2020-11-19 |
| 公开（公告）号： | CN112516299A | 公开（公告）日： | 2021-03-19 |
| 发明（设计）人： | 高任;欧阳征亮;陈瑞爱;王阿明;吉华松 | 申请（专利权）人： | 肇庆大华农生物药品有限公司 |
| 主分类号： | A61K39/02 | 分类号： | A61K39/02;A61P31/04;C12N1/36;C12R1/20 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 肖宇扬;付静 |
| 地址： | 526000 广东省肇*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 柱状 杆菌 减毒灭活 疫苗 制备 方法 | ||
1.一种柱状黄杆菌减毒灭活疫苗制备方法，其特征在于，包括
减毒株筛选步骤：取柱状黄杆菌，在50-700ug/mL的抗生素条件下连续筛选10-40代，获得减毒株；
灭活步骤：取减毒株，在2-8℃下，浓度为0.5-1‰的甲醛溶液中灭活36-108h。
2.根据权利要求1所述一种柱状黄杆菌减毒灭活疫苗制备方法，其特征在于，所述减毒株筛选步骤采用培养基成份如下：无机盐0.5-1g/L、蛋白胨4-5g/L、凝胶粉15-18g/L，所述无机盐由乙酸钠、二水氯化钡、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、七水硫酸亚铁、碳酸氢钠中的一种或多种组成。
3.根据权利要求2所述一种柱状黄杆菌减毒灭活疫苗制备方法，其特征在于，所述无机盐包括：乙酸钠0.02g/L，二水氯化钡0.01g/L，磷酸氢二钾0.1g/L，磷酸二氢钾0.05g/L，七水硫酸镁0.6g/L，二水氯化钙0.0067g/L，七水硫酸亚铁0.002g/L，碳酸氢钠0.05g/L。
4.根据权利要求2所述一种柱状黄杆菌减毒灭活疫苗制备方法，其特征在于，所述柱状黄杆菌分离培养基还包括酵母提取物0.4-0.5g/L。
5.根据权利要求1所述一种柱状黄杆菌减毒灭活疫苗制备方法，其特征在于，所述抗生素为利福平、妥布霉素中的一种或多种。
6.根据权利要求5所述一种柱状黄杆菌减毒灭活疫苗制备方法，其特征在于，所述抗生素为利福平50-600μg/mL和妥布霉素1-2μg/mL。
7.根据权利要求2所述一种柱状黄杆菌减毒灭活疫苗制备方法，其特征在于，所述凝胶粉为琼脂粉。
8.根据权利要求2所述一种柱状黄杆菌减毒灭活疫苗制备方法，其特征在于，所述蛋白胨为胰蛋白胨。
9.根据权利要求1所述一种柱状黄杆菌减毒灭活疫苗制备方法，其特征在于，灭活步骤具体为：取培养后的菌，在4℃下，浓度为1‰的甲醛溶液中灭活48h。
10.根据权利要求1所述一种柱状黄杆菌减毒灭活疫苗制备方法，其特征在于，灭活步骤具体为：取培养后的菌，在4℃下，浓度为0.5‰的甲醛溶液中灭活108h。
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