[发明专利]一种腐烂病菌毒素化合物、制备方法及其应用

权利要求书

1.一种腐烂病菌毒素化合物，其特征在于，该化合物具有如下式（I）所示的化学结构式：

。

2.一种如权利要求1所述的腐烂病菌毒素化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，将苹果树皮提取物、0.2%酵母粉、0.5%蔗糖混合，调节混合液pH为5.8，121℃灭菌20 min，得到苹果树皮培养基；

步骤2，将苹果树腐烂病菌野生型菌株03-8接种至PDA培养基上，25℃培养3d，所得菌饼接种于步骤1制备的苹果树皮培养基中，26℃进行培养，每天摇瓶4次，转速为120 rpm，培养14 d，发酵产物抽滤，得到发酵液；

步骤3，将发酵液通过吸附树脂进行梯度洗脱，洗脱剂为甲醇和水，甲醇与水的体积比为30~100：70~0；获得目标馏分；

步骤4，采用液相色谱法对目标馏分进行梯度洗脱，得到化合物；

液相色谱条件为：洗脱剂为乙腈和水，其中乙腈的体积分数为10%~90%，水的体积分数为0~90%，总体积分数之和为100%；洗脱剂流速为8~10mL/min；柱温为25~35℃；检测波长为210~254 nm。

3.如权利要求2所述的腐烂病菌毒素化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤4的梯度洗脱为三个梯度，洗脱剂依次分别为：第一次洗脱剂中乙腈与水的体积比为10：90，洗脱时间为5~10min；第二次洗脱剂中乙腈与水的体积比为10~100：90~0，洗脱时间为40~50min；第三次洗脱剂中乙腈与水的体积比为100：0，洗脱时间为5~10min。

4.如权利要求2所述的腐烂病菌毒素化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤3中的吸附树脂为D101型大孔吸附树脂、D101B型大孔吸附树脂、XDA-1型大孔吸附树脂、H-30型大孔吸附树脂、H-60型大孔吸附树脂中的任一种。

5.如权利要求2所述的腐烂病菌毒素化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤2中依次用定性滤纸和0.2~0.45μm滤膜抽滤对发酵产物进行抽滤。

6.一种如权利要求1所述的腐烂病菌毒素化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，将4-乙烯基苯酚、1,3,5-三甲氧基苯和磷酸二苯酯加入二氯乙烷中，90℃~110℃下进行反应20~22h，产物经洗脱纯化后，得到中间体；

所述4-乙烯基苯酚、1,3,5-三甲氧基苯、磷酸二苯酯的摩尔比为20:40:1；

步骤2，将中间体、碘化钾、BBr₃加入二氯乙烷中，室温下搅拌反5~7h后，再加入碱反应直至气泡消失，调节体系pH值为中性，过滤、洗脱反应物，得到毒素化合物；

所述中间体、碘化钾、BBr₃的摩尔比为1:12:12。

7.如权利要求6所述的腐烂病菌毒素化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤1中产物采用液相色谱法进行洗脱纯化，洗脱过程中洗脱液包括石油醚与乙酸乙酯，石油醚与乙酸乙酯的体积比为5~20:1。

8.如权利要求6所述的腐烂病菌毒素化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，将反应物经液相色谱法进行梯度洗脱，洗脱液包括石油醚与乙酸乙酯，其中石油醚与乙酸乙酯的体积比为2~10:1。

9.如权利要求6所述的腐烂病菌毒素化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤2中碱为碳酸氢钠、NaOH、Na₂CO₃中的任一种。

10.一种权利要求1所述的腐烂病菌毒素化合物用作植物毒素的应用。