[发明专利]一种流感H3N2的LAMP引物组筛选方法在审
申请号: | 202011314062.1 | 申请日: | 2020-11-20 |
公开(公告)号: | CN112725526A | 公开(公告)日: | 2021-04-30 |
发明(设计)人: | 钱晓华;廖夏;陈道湧;赵戴君;于晓南;杨吉星;张静;刘恬恬 | 申请(专利权)人: | 上海市虹口区疾病预防控制中心 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 上海宣宜专利代理事务所(普通合伙) 31288 | 代理人: | 刘洁瑜 |
地址: | 200000 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 流感 h3n2 lamp 引物 筛选 方法 | ||
1.一种流感H3N2的LAMP引物组筛选方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一:用传统PCR检测确定阳性样本,并以此作为LAMP检测方法的对照;
步骤二:利用LAMP引物设计软件设计出多组流感H3N2的LAMP引物组;
步骤三:样本逆转录,将样本从RNA样本逆转录成cDNA样本;
步骤四:用多组流感H3N2的LAMP引物组对样本进行LAMP试验;
步骤五:对步骤四中的产物进行电泳检测;
步骤六:根据步骤五中的电泳检测实验结果,筛选出有效的LAMP引物组。
2.根据权利要求1所述的流感H3N2的LAMP引物组筛选方法,其特征在于,所述LAMP引物组包括内引物、外引物以及环引物。
3.根据权利要求2所述的流感H3N2的LAMP引物组筛选方法,其特征在于,所述步骤四具体为,制备反应体系,每个样本使用各引物组中的3种引物共6条,每个反应管分别加入5ul样本以及阳性对照样本、阴性对照样本置于不同的反应管中,再将反应管置于LAMP扩增仪中,在65℃条件下进行反应60min,反应结束后拍照记录图像。
4.根据权利要求3所述的流感H3N2的LAMP引物组筛选方法,其特征在于,所述步骤五具体为,使用1.5%的琼脂糖凝胶对LAMP扩增仪扩增的产物进行电泳检测,实验条件为120V,35min,之后在凝胶成像仪中照射紫外拍照。
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