[发明专利]γ-谷氨酰激酶突变体及其应用有效
| 申请号： | 202011316277.7 | 申请日： | 2020-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN112111469B | 公开（公告）日： | 2021-02-26 |
| 发明（设计）人： | 郑平;刘娇;王钰;孙际宾;刘莫识;周文娟;郭轩;马延和 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/24;C12R1/19;C12R1/15 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 白艳 |
| 地址： | 300308 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 谷氨酰 激酶 突变体 及其 应用 | ||
1. γ-谷氨酰激酶突变体蛋白，为如下A或B：
A）所述的蛋白为将谷氨酸棒杆菌的γ-谷氨酰激酶对应于序列1所示的氨基酸序列第150位残基进行突变，得到具有γ-谷氨酰激酶活性的蛋白；
B）所述的蛋白为将A所示蛋白的氨基酸序列末端添加标签序列且具有γ-谷氨酰激酶活性的由A衍生的蛋白；
所述突变为将谷氨酸棒杆菌的γ-谷氨酰激酶对应于序列1所示的氨基酸序列第150位残基由缬氨酸突变为天冬酰胺、苏氨酸、组氨酸、酪氨酸中的任一个。
2.根据权利要求1所述的突变体蛋白，其特征在于：所述突变为将对应于序列1所示的氨基酸序列第150位残基由缬氨酸突变为天冬酰胺或苏氨酸。
3.一种具有γ-谷氨酰激酶活性的组合物，其包括含有权利要求1或2所述γ-谷氨酰激酶突变体蛋白的蛋白组合物或含有权利要求1或2所述γ-谷氨酰激酶突变体蛋白的融合蛋白。
4.编码权利要求1或2所述突变体蛋白的多核苷酸或编码权利要求3中所述组合物的多核苷酸。
5.含有编码权利要求1或2所述突变体蛋白的多核苷酸或权利要求3中所述多核苷酸的表达盒或重组载体或重组微生物。
6.根据权利要求5所述的重组微生物，其特征在于：所述重组微生物按照包括如下步骤的方法制备：将谷氨酸棒杆菌中γ-谷氨酰激酶氨基酸序列对应于序列1第150位的氨基酸残基进行突变，得到重组微生物；
所述突变为将所述谷氨酸棒杆菌的γ-谷氨酰激酶氨基酸序列对应于序列1第150位残基由缬氨酸突变为天冬酰胺、苏氨酸、组氨酸、酪氨酸中的任一个。
7.权利要求1或2所述突变体蛋白或权利要求4所述的多核苷酸或权利要求5所述的表达盒或重组载体或权利要求5-6任一所述的重组微生物在制备L-脯氨酸或其衍生物中的应用，所述衍生物为羟基脯氨酸。
8.一种生产L-脯氨酸或其衍生物的方法，包括如下步骤：发酵培养权利要求5-6中任一所述重组微生物，得到L-脯氨酸或其衍生物，所述衍生物为羟基脯氨酸。
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