[发明专利]单细胞分离器及其在分离单细胞过程中的应用和单克隆细胞制备方法在审
申请号: | 202011316792.5 | 申请日: | 2020-11-20 |
公开(公告)号: | CN112391273A | 公开(公告)日: | 2021-02-23 |
发明(设计)人: | 贺笋;张迪;赵毅;张丹;刘宏 | 申请(专利权)人: | 天康生物股份有限公司 |
主分类号: | C12M1/26 | 分类号: | C12M1/26;C12N5/00 |
代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 刘桐亚 |
地址: | 830000 新疆维吾尔自治区*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 单细胞 分离器 及其 分离 过程 中的 应用 单克隆 细胞 制备 方法 | ||
1.一种单细胞分离器,其特征在于,所述单细胞分离器包括移液针头和吸液装置,
所述移液针头与吸液装置紧密且无泄漏连通,所述移液针头包括距离针口0.5~1cm处呈75~90°弯曲的静脉注射针头。
2.根据权利要求1所述的单细胞分离器,其特征在于,所述吸液装置包括10ul、20ul、30ul、100ul或200ul中的一种,优选为20ul的移液器。
3.根据权利要求1所述的单细胞分离器,其特征在于,所述移液针头包括距离针口0.8~1cm处呈85~90°弯曲的静脉注射针头。
4.根据权利要求3所述的单细胞分离器,其特征在于,所述移液针头为距离针口0.8cm处呈90°弯曲的静脉注射针头。
5.根据权利要求1~4任一项所述的单细胞分离器,其特征在于,所述移液针头的针口为平口。
6.一种根据权利要求1~5任一项所述的单细胞分离器在分离单细胞过程中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述单细胞包括贴壁细胞和/或悬浮细胞。
8.一种单克隆细胞制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
提供含悬浮细胞的细胞液,随后在显微镜下,利用权利要求1~5任一项所述的单细胞分离器对细胞液中的单细胞进行吸取,随后对单细胞进行培养,得到单克隆细胞;
或,提供含贴壁细胞的细胞液,随后在显微镜下,利用权利要求1~5任一项所述的单细胞分离器对细胞液中的单细胞进行吸取,随后对单细胞进行培养,得到单克隆细胞。
9.根据权利要求8所述的单克隆细胞制备方法,其特征在于,所述含悬浮细胞或贴壁细胞的细胞液中的细胞密度为200~250×104cells/ml。
10.根据权利要求8所述的单克隆细胞制备方法,其特征在于,所述培养包括在35~40℃下培养2~4h,优选为在37℃下培养3h;
优选地,所述培养的气体环境,按体积百分比计,二氧化碳占5%,空气占95%。
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