[发明专利]单克隆细胞培养基、应用及培养单克隆细胞的方法在审
| 申请号： | 202011316793.X | 申请日： | 2020-11-20 |
| 公开（公告）号： | CN112391335A | 公开（公告）日： | 2021-02-23 |
| 发明（设计）人： | 贺笋;张迪;赵毅;刘宏;付智才 | 申请（专利权）人： | 天康生物股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人： | 张金铭 |
| 地址： | 830000 新疆维吾尔自治区*** | 国省代码： | 新疆;65 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 单克隆 细胞 培养基 应用 培养 方法 | ||
1.一种单克隆细胞培养基，其特征在于，所述单克隆细胞培养基包括基础培养基和条件培养基；
所述条件培养基包括经冻融及离心处理的同源细胞系的培养基。
2.根据权利要求1所述的单克隆细胞培养基，其特征在于，所述冻融包括在-25～-15℃温度下反复冻融；
优选地，所述冻融包括在-20℃温度下反复冻融2次；
优选地，所述离心的条件包括在800～1200r/min条件下离心8～12min；
优选地，所述离心的条件包括在1000r/min条件下离心10min。
3.根据权利要求1所述的单克隆细胞培养基，其特征在于，所述同源细胞系的培养基包括处于对数生长晚期的同源细胞系的培养基。
4.根据权利要求1所述的单克隆细胞培养基，其特征在于，在冻融和离心处理后还包括除菌的步骤；
优选地，采用过滤的方式进行除菌。
5.根据权利要求1所述的单克隆细胞培养基，其特征在于，所述基础培养基包括基本培养基、白蛋白、生长因子和激素。
6.根据权利要求5所述的单克隆细胞培养基，其特征在于，所述基本培养基包括DMEM或MEM；
优选地，所述白蛋白包括胎牛血清白蛋白和/或转铁蛋白；
优选地，所述生长因子包括碱性成纤维细胞生长因子和/或表皮生长因子，优选为碱性成纤维细胞生长因子；
优选地，所述激素包括地塞米松、氢化可的松或胰岛素中的一种或多种，优选为地塞米松；
优选地，所述基础培养基包括含有8％～12％(w/w)胎牛血清白蛋白、10-20ng/ml碱性成纤维细胞生长因子和3-10μg/ml地塞米松的DMEM；
优选地，所述基础培养基包括含有10％(w/w)胎牛血清白蛋白、15ng/ml碱性成纤维细胞生长因子和5μg/ml地塞米松的DMEM。
7.根据权利要求1-6任一项所述的单克隆细胞培养基，其特征在于，所述基础培养基与所述条件培养基的体积比为1～3:1，优选为2:1。
8.权利要求1-7任一项所述的单克隆细胞培养基在培养单克隆细胞中的应用。
9.一种培养单克隆细胞的方法，其特征在于，所述方法包括使用权利要求1-7任一项所述的单克隆细胞培养基进行培养。
10.根据权利要求9所述的培养单克隆细胞的方法，其特征在于，所述方法包括在96孔平底细胞培养板中进行培养，所述96孔平底细胞培养板中每孔含有至少200μl的单克隆细胞培养基。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于天康生物股份有限公司，未经天康生物股份有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202011316793.X/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
