[发明专利]一种水解紫菜的酶制剂及其制备方法

说明书

本发明涉及一种水解紫菜的酶制剂及其制备方法，该方法包括：将鲍鱼内脏清洗干净，经绞肉机绞成浆状；将鲍鱼内脏浆与20mM Tris‑HCl缓冲液混合后，置于组织捣碎机中匀浆，离心，过滤，收集滤液；在滤液中加入活性炭脱色，混合均匀后，再次离心，取上清；将上清上样于串联离子交换树脂，依次用20mM Tris‑HCl缓冲液、20mM HAc‑NAc缓冲液和蒸馏水洗脱，收集蒸馏水洗脱所得组分；将蒸馏水洗脱所得组分上样于超滤膜进行超滤浓缩至固形物浓度为10％，得浓缩液，浓缩液再冷冻干燥，得酶制剂。该方法简易，能耗低，对环境污染小，可制备出酶活性高、可高效水解紫菜的酶制剂，以使紫菜得到高效利用。

技术领域

本发明涉及制备酶制剂技术领域，具体涉及一种水解紫菜的酶制剂及其制备方法。

背景技术

紫菜富含膳食纤维与多种微量元素，而且还含藻类特有的藻胆蛋白,具有很高的营养价值。目前，大部分品质较好的头水、二水紫菜都被加工成海苔，海苔饼干，海苔面包等一系列以紫菜为原料的产品，而剩余品质较差的紫菜由于口感与色泽上不满足紫菜产品的质量标准，往往被直接丢弃或者作为饲料用于水产养殖动物。然而，这类紫菜原料中通常含有更高含量的紫菜多糖。

紫菜多糖主要是存在于细胞壁中，具有粘性高、分子量大、溶解性差的特点。为获取紫菜多糖，大都是通过酶解的手段对紫菜进行水解，使多糖溶出。酶制剂作为一种高效的生物催化剂，目前常用于多糖水解的酶有纤维素酶、果胶酶、糖化酶和淀粉酶等。然而，由于这些酶只能专一的切割某一糖苷键，其对紫菜破壁与多糖水解的作用有限。迄今为止，依然没有高效水解紫菜多糖的食品级商业化酶制剂，这也极大限制了紫菜多糖的开发与高效利用。

当前，动物组织中酶制剂的提取与制备方法一般为水提、浓缩、冻干等工艺，产品的纯度低、活力差。酶制剂的进一步纯化则需要多级的柱层析分离才能实现，制备过程中需要对样品进行透析脱盐、置换缓冲体系，对每一步的层析柱进行洗脱、清洗与再生，工艺繁琐，耗时长，不适于工业化的连续生产。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的目的在于提供一种水解紫菜的酶制剂及其制备方法。该方法简易，能耗低，对环境污染小，可制备出酶活性高、可高效水解紫菜的酶制剂，以使紫菜得到高效利用。

为此，根据本发明的实施例，本发明提出了一种水解紫菜的酶制剂的制备方法，其包括以下步骤：

(1)将鲍鱼内脏清洗干净，经绞肉机绞成浆状，得到鲍鱼内脏浆；

(2)将所述鲍鱼内脏浆与20mM Tris-HCl缓冲液混合后，置于组织捣碎机中匀浆，离心，过滤，收集滤液；在所述滤液中加入活性炭脱色，混合均匀后，再次离心，取上清；

(3)将所述上清上样于串联离子交换树脂，依次用20mM Tris-HCl缓冲液、20mMHAc-NAc缓冲液和蒸馏水洗脱，收集蒸馏水洗脱所得组分；

(4)将所述蒸馏水洗脱所得组分上样于超滤膜进行超滤浓缩至固形物浓度为10％，得浓缩液，浓缩液再冷冻干燥，得酶制剂。

根据本发明实施例的水解紫菜的酶制剂的制备方法，该方法采用缓冲液提取、活性炭脱色、串联离子交换色谱和超滤浓缩的方法制备紫菜高效水解酶制剂；其中，通过柱层析方法制备酶制剂，能有效去除杂质与生物组织原料带有的不良气味，这为产品在食品领域中的应用提供了保障；采用了串联离子交换色谱分离技术，突破了传统交换色谱分离纯化过程中不同树脂间样品需要透析脱盐、置换缓冲体系处理的问题，实现了一步式的高效纯化酶制剂；经串联离子交换色谱收集得到的酶液中不含盐，经浓缩、冻干后酶制剂有纯度高、活力高的特点；并且该酶制剂拥有复合酶体系，能高效的水解紫菜。

其中，鲍鱼内脏可以是新鲜鲍鱼内脏或冻存的鲍鱼内脏。鲍鱼内脏可以包括皱纹盘鲍、杂色鲍、九孔鲍等福建常见鲍鱼的内脏。

另外，根据本发明上述实施例提出的水解紫菜的酶制剂的制备方法，还可以具有如下附加的技术特征：