[发明专利]高粱耐盐碱胁迫基因、检测引物组和试剂盒及应用有效
| 申请号： | 202011319398.7 | 申请日： | 2020-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN112280789B | 公开（公告）日： | 2022-11-04 |
| 发明（设计）人： | 侯升林;再吐尼古丽·库尔班;董明;叶凯;刘国庆;吕芃;杜瑞恒 | 申请（专利权）人： | 河北省农林科学院谷子研究所;新疆农业科学院生物质能源研究所 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/11;C12Q1/6895;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 薛红凡 |
| 地址： | 050035 河北*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 高粱 盐碱 胁迫 基因 检测 引物 试剂盒 应用 | ||
1.一种检测高粱耐盐碱胁迫性状的方法，其特征在于，包括以下步骤：以检测高粱耐盐碱胁迫性状的试剂盒中的引物组为引物，以高粱RNA反转录后得到的第一链cDNA为模板，进行qRT-PCR；
所述试剂盒中包括一组检测高粱耐盐碱胁迫基因的引物组和内参基因；
所述高粱耐盐碱胁迫基因的cDNA序列如SEQ ID NO.1所示；
所述引物组，包括引物F和引物R，所述引物F的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述引物R的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；
所述内参基因为GAPDH和Actin；所述GAPDH的扩增引物对包括GAPDH-F和GAPDH-R，所述GAPDH-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述GAPDH-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；
所述Actin的扩增引物对包括Actin-F和Actin-R，所述Actin-F的核苷酸序列如SEQ IDNO.6所示，所述Actin-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述高粱RNA提取自高粱叶片。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述qRT-PCR的体系以20μL计，包括：F引物0.4μL，R引物 0.4μL，2×TransStart Top Green qPCR SuperMix 10μL，模板2μL和余量的ddH2O。
4.根据权利要求1或3所述方法，其特征在于，所述qRT-PCR的程序包括：94℃预变性2min；94℃变性5s，60℃退火15s，72℃延伸10s，45个循环。
5.权利要求1~4任一项所述方法在筛选耐盐碱胁迫高粱种质中的应用。
6.权利要求1~4任一项所述方法在选育耐盐碱胁迫高粱新品种中的应用。
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