[发明专利]猪冷冻精液基础稀释液及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种猪冷冻精液基础稀释液，包括葡萄糖、柠檬酸、胆固醇、L‑脯氨酸、Tris和双蒸馏水；猪冷冻精液冻存液还包括以体积分数计，20%新鲜卵黄、1×10⁶ IU/L青霉素、1×10⁶ IU/L链霉素和3%‑4%甘油和1%‑2% Equex.STM；猪保鲜精稀释液还包括等渗脱脂牛奶。本发明能有效维持地方品种猪鲜精在长途运输过程中的存活率，并通过加入猪肝脏来源胆固醇、L‑脯氨酸以及抗冻剂Equex.STM防止或显著降低猪精子在冷冻过程中的损害；且通过有效的解冻方法，操作方便，提高精子活力与质量。

技术领域

本发明属于农业生物育种技术领域，具体涉及一种猪冷冻精液稀释液配方。

背景技术

过去几十年来由于大量国外猪种的引入和大规模饲养，导致我国地方猪品种数量锐减，而且品种内血统数也在不断减少，遗传多样性降低，使很多地方猪品种濒临灭绝。近年来随着保护地方品种资源的意识提高，开始采取多种措施对地方猪品种进行保护，而对公猪精液进行冷冻保存，则是一种方便有效的保存手段。冷冻精液是生物安全系数更高的精液来源。可在闲时储备，平衡供需。因为鲜精保存时间短，在旺季时供不应求，但在闲时却产能过剩导致闲置浪费。冷冻精液可以把合格的精液全部冻存，把不合格的精液及时清除，提高精液质量，平衡淡旺季的需求，也可以随时进行跨区域调配，平衡不同生产区域的需求，具有便捷运输的优点。也可以节约成本增加成效，降低公畜的饲养存栏量。冻精集成技术可以提高种公畜的利用率接近100 %，大幅减少种公畜的饲养存栏数量，节约场地建设、饲养管理成本等，还可以减少建设用地，减少粪污排放，缓解环保的压力。同样也是保种育种的重要手段。冷冻精液具有可长期保存的特点，可以延长种公畜遗传物质的使用时间，不受种公畜死亡等限制，在保留和恢复精液供应、血统更新、引种等方面均有重要意义，一直是保种育种的重要手段。

20世纪80年代后期我国大量引进国外品种猪后，为追求高产肉量和短期经济效益，养猪户纷纷转向养殖外来品种猪，地方猪的饲养数量急剧下降。现阶段，猪精液的冷冻制作及保存关键技术研究受到了全球养猪业重视和关注，我国猪冷冻精液的研究虽然在技术上已经取得了一定的突破，但是也有很多研究报道了猪特别是地方猪品种的冷冻精液制作在技术上还有待进一步完善。由于地方猪品种精子的生物学特性，其精液冷冻制作技术要求不完全与商业猪的冷冻精液制作技术相同，主要是地方猪品种的精子在冷冻、解冻过程中更容易受到损伤。

因此，深入系统地研究猪精液冷冻机理和生产过程的关键技术，探讨影响猪冻精活力及受精能力的因素，进一步改进猪精液冷冻技术及操作方法，已成为猪育种的关键技术问题，尤其是国内地方种猪育种生产中渴望解决的急迫问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种猪冷冻精液基础稀释液配方及其制备方法，另一目的是提供该配方具体应用，以弥补现有技术的不足。

为达到上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种猪冷冻精液基础稀释液，包括葡萄糖、柠檬酸、胆固醇、L-脯氨酸、Tris和双蒸馏水。

进一步的，所述胆固醇优选为猪肝脏来源胆固醇。

进一步的，所述猪冷冻精液基础稀释液，包括葡萄糖15.98±0.5 g/L、柠檬酸19.67±0.5 g/L、胆固醇4.83±0.2 g/L、L-脯氨酸3.45±0.2 g/L、Tris 35.2±0.5 g/L和双蒸馏水 1 L。

一种猪冷冻精液冻存液中，除上述猪冷冻精液基础稀释液外，还包括以体积分数计，20% 新鲜卵黄、1×10⁶ IU/L青霉素、1×10⁶ IU/L链霉素和3%-4%甘油和1%-2%Equex.STM。

一种猪保鲜精稀释液中，除上述猪冷冻精液基础稀释液外，还包括等渗脱脂牛奶，添加等渗脱脂牛奶的量与猪冷冻精液基础稀释液体积比为1：1，再利用0.22 um的滤菌膜过滤。