[发明专利]一种可提高益生菌常温保存活性的冻干技术

说明书

本发明涉及益生菌的技术领域，特别是涉及一种可提高益生菌常温保存活性的冻干技术，有效提高益生菌的耐酸能力，提高益生菌活性；包括以下步骤：S1、将益生菌接种至低酸性培养基中；S2、将步骤S1中活化后的菌种接种至低酸性培养基进行划线培养，选取过渡优势菌种；S3、将过渡优势菌种接种至高酸性培养基中进行培养；S4、将S3中产物接种至高酸性培养基进行划线培养，选取耐酸优势菌种；S5、将耐酸优势菌种接种至高酸性培养基中，得到增殖的菌液；S6、取一定体积的上述增殖菌液在4℃，6000r/min的条件下离心15min后，收集沉淀；相同离心条件下，将沉淀用无菌生理盐水离心洗涤2次，得菌泥；S7、混合均匀真空冷冻干燥，制得成品。

技术领域

本发明涉及益生菌的技术领域，特别是涉及一种可提高益生菌常温保存活性的冻干技术。

背景技术

益生菌是活的、对人体健康有益的一类微生物。当适量摄入时，可以抑制消化道致病菌繁殖，维持肠道菌群平衡，促进营养物质的吸收，从而提高机体免疫力。通常认为益生菌要发挥其益生功效，必须在产品与宿主中都保持活性和代谢稳定，一般要求每g或每mL产品中活菌数不少于106CFU。然而，在益生菌产品的生产、运输、销售、贮藏等环节，益生菌活性极易受pH、温度、氧以及宿主消化系统(人体胃部的pH值大约是1.8～3.0)的影响，其活菌数将大幅下降，使最终定植于肠道中的活菌数低于理论值。

益生菌制剂在被食用时，需要经过人体消化道的低酸性环境，造成益生菌到达肠道时活性较低，至目前为止，提高益生菌存活率的方法主要有：筛选耐酸菌株、添加受体以强化菌株的稳定性、添加还原剂或者抗氧化剂、微胶囊技术、双层包埋技术、基因融合技术等，但这些方法本身在安全、实用性上均存在着一定的缺陷，因此，提出一种可提高益生菌常温保存活性的冻干技术来解决上述问题。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种可提高益生菌常温保存活性的冻干技术，有效提高益生菌的耐酸能力，提高益生菌活性。

本发明的一种可提高益生菌常温保存活性的冻干技术，包括以下步骤：

S1、将益生菌接种至低酸性培养基中，接种比例为10-20％；

S2、将步骤S1中活化后的菌种接种至低酸性培养基进行划线培养，选取过渡优势菌种；

S3、将过渡优势菌种接种至高酸性培养基中进行培养，接种比例10-20％；

S4、将S3中产物接种至高酸性培养基进行划线培养，选取耐酸优势菌种；

S5、将耐酸优势菌种接种至高酸性培养基中，进行增殖培养，接种比例为5％，得到增殖的菌液；

S6、取一定体积的上述增殖菌液在4℃，6000r/min的条件下离心15min后，收集沉淀；相同离心条件下，将沉淀用无菌生理盐水离心洗涤2次，得菌泥；

S7、将制备的菌泥用相同体积的生理盐水重悬，制成菌悬液，按照每100mL菌悬液添加红糖10-15g、脱脂乳粉10-15g、月见草油3-6g、麦芽糊精10-20g，混合均匀真空冷冻干燥，制得成品。

本发明的一种可提高益生菌常温保存活性的冻干技术，所述步骤S1中益生菌菌种包括植物乳杆菌、瑞士乳杆菌、嗜酸乳杆菌、长双歧杆菌、两歧双歧杆菌以及短双歧杆菌。

本发明的一种可提高益生菌常温保存活性的冻干技术，所述步骤S1和步骤S2中低酸性培养基制备方法为：向MRS培养基中滴加盐酸溶液，直至pH至4-5。

本发明的一种可提高益生菌常温保存活性的冻干技术，所述步骤S3、S4、S5中高酸性培养基制备方法为：向MRS培养基中滴加盐酸溶液，直至pH至2。

本发明的一种可提高益生菌常温保存活性的冻干技术，所述步骤S1中接种比例为10-15％。