[发明专利]含VEGF纳米抗体的药物组合物及其用途

说明书

本发明提供了含VEGF纳米抗体的药物组合物及其用途。具体地，本发明提供了一种药物组合物，其含有VEGF纳米抗体，穿膜肽和药学上可接受的载体。本发明的药物组合物能够有效穿透细胞膜，所含有的穿膜肽能够显著促进VEGF纳米抗体的细胞膜穿透性。本发明的药物组合物能够有效渗透癌细胞、角膜细胞，随着穿膜肽浓度的提高，VEGF纳米抗体对细胞的摄入效果显著提高，且在高剂量时只有轻微毒性，具有非常好的安全性。

技术领域

本发明涉及生物医学或生物制药领域，更具体地涉及一种含VEGF纳米抗体的药物组合物及其用途。

背景技术

细胞穿膜肽(Cell-penetrating Peptides,CPPs)是一类能穿透细胞膜的短链多肽。研究发现，CPPs能够与各种药物分子结合并将药物递送至细胞内。关于CPPs的跨膜和细胞摄取机制，已经诸多实验和报告进行了解释，但CPPs进入细胞的确切途径仍待进一步的研究。目前，研究发现人为设置的条件会影响实验结果，不同的CPPs进入不同的细胞会有不同的摄取途径，CPPs所带的货物也会对CPPs的内化机制产生影响。值得注意的是，CPPs的内化途径并不是固定不变的，许多CPPs能够用多种途径完成内化。并且，CPPs的内化机制还会随着自身浓度、细胞组织、携带货物的不同而产生变化。目前研究较多的穿膜肽包括：TAT、Penetratin、Protamine、Transpotan、MPG等。其中Penetratin来源于果蝇触角蛋白同源结构域，是一条两亲性的穿膜肽，因为具有较好的穿膜效应而被作为一个潜在药物载体用于各种目的。Penetratin序列中的阳离子氨基酸精氨酸和赖氨酸是发挥穿膜活性的不可替代的位点，如果对它们进行替换或改造会降低穿膜效应，而序列中的色氨酸、苯丙氨酸和异亮氨酸为疏水性氨基酸，可以促进肽与细胞膜脂质的相互作用。文献Sgolastra F,Deronde BM,Sarapas J M,et al.Designing Mimics of Membrane Active Proteins[J].Accountsof Chemical Research,2013,46(12):2977-87中公开了Penetratin衍生物RQIKIWFQWRRMKWKK，表明疏水残基对于细胞摄取具有重要作用。中国发明专利CN101355970A公开了Penetratin衍生物RQIKIWFWNRRMKWKK。中国发明专利CN108976288A公开了多种Penetratin衍生物的序列。文献表明，在Penetratin分子中引入疏水性氨基酸能够增强Penetratin衍生物对于细胞的穿透能力。

VEGF纳米抗体具有稳定性高、水溶性好、人源化简单、靶向性高、穿透性强等特点，在免疫实验、诊断与治疗中，发挥着超乎想象的巨大功能。如果将VEGF纳米抗体与穿膜肽联合使用，则能提高VEGF纳米抗体药物的利用率，进一步则可能开发出高药效的VEGF纳米抗体抗肿瘤药物制剂以及通过滴眼式给药的VEGF纳米抗体眼科制剂形式。目前尚未有高药效、低毒性的VEGF纳米抗体与穿膜肽联用的药物组合物公开。

因此，开发一种VEGF纳米抗体药物组合物，提高VEGF纳米抗体对细胞的摄入效果，具有较好的临床应用前景，可以为制备药效高、毒性低的VEGF纳米抗体药物制剂，尤其是对于开发滴眼式药物制剂奠定良好的基础。

发明内容

本发明的目的在于提供一种含VEGF纳米抗体的药物组合物及其用途。

本发明的第一方面，提供了一种药物组合物，所述的药物组合物含有：

(a)抗VEGF纳米抗体；

(b)穿膜肽；和

(c)药学上可接受的载体。

在另一优选例中，所述抗VEGF纳米抗体的互补决定区(CDR)为SEQ ID NO:1所示的CDR1、SEQ ID NO:2所示的CDR2、和SEQ ID NO:3所示的CDR3。

在另一优选例中，所述抗VEGF纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。