[发明专利]一种CD7-CAR-T细胞的制备方法及应用在审
| 申请号： | 202011325596.4 | 申请日： | 2020-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN114525306A | 公开（公告）日： | 2022-05-24 |
| 发明（设计）人： | 不公告发明人 | 申请（专利权）人： | 博生吉医药科技（苏州）有限公司;博生吉安科细胞技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/62;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00;A61P35/02 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 肖艳;徐迅 |
| 地址： | 215000 江苏省苏州市苏州工*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 cd7 car 细胞 制备 方法 应用 | ||
1.一种制备CD7-CAR-T细胞的方法，其特征在于，包括步骤：
(i)提供一含T细胞的待处理样本，
(ii)分选并活化所述样本中包含的T细胞，从而得到激活的T细胞，
(iii)将用于表达CD7阻断分子的第一病毒载体导入到所述激活的T细胞，从而得到CD7被阻断的T细胞，和
(iv)将用于表达CD7-CAR的第二病毒载体导入到所述CD7被阻断的T细胞，从而得到所述CD7-CAR-T细胞，
其中，所述T细胞与激活剂共孵育12-36h后，较佳地，18-30h，更佳地，22-26h，将用于表达CD7阻断分子的第一病毒载体导入到所述激活的T细胞。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(iii)中，包括步骤：
(a)在适合转染的条件下，将用于表达CD7阻断分子的第一病毒载体与所述激活的T细胞共培养36-60h，较佳地，42-54h，更佳地，46-50h，从而得到第一转染混合液；
(b)去除所述第一转染混合液中的第一病毒载体，从而得到CD7被阻断的T细胞。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤(b)中，还包括去除步骤(ii)中所添加的激活剂的步骤。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(iv)中，包括步骤：
(c)在适合转染的条件下，将用于表达CD7-CAR的第二病毒载体与所述CD7被阻断的T细胞共培养12-36h，较佳地，18-30h，更佳地，22-26h，从而得到第二转染混合液；
(d)去除所述第二转染混合液中的第二病毒载体，从而得到所述CD7-CAR-T细胞。
5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤(a)中，所述的第一病毒载体与T细胞的数量比(感染复数)为1:0.05-0.4。
6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，在步骤(c)中，所述的第二病毒载体与T细胞的数量比(感染复数)为1:0.5-4。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(iv)之后，还包括步骤：
(v)在适合T细胞扩增的条件下，对所述CD7-CAR-T细胞进行扩大培养。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述CD7阻断分子包括一个或多个CD7纳米抗体和内质网滞留序列。
9.一种权利要求1所述方法制备的CD7-CAR-T细胞。
10.一种制剂，其特征在于，所述制剂含有权利要求9所述的CD7-CAR-T细胞，以及药学上可接受的载体。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于博生吉医药科技（苏州）有限公司;博生吉安科细胞技术有限公司，未经博生吉医药科技（苏州）有限公司;博生吉安科细胞技术有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202011325596.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种波束的处理方法及装置、通信设备
- 下一篇：光源光谱获取方法和设备
